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蚝油生菜

新虫 (小有名气)

[交流] pet28a双酶切已有4人参与

实验室暂时只有2000的marker,marker旁边是未酶切的质粒,旁边三条泳道都是双酶切的质粒,大小和未酶切的质粒的超螺旋大小一样正常吗?

pet28a双酶切


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乌克兰跑男

铜虫 (正式写手)


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引用回帖:
4楼: originally posted by 蚝油生菜 at 2022-07-14 17:42:35
小提,试剂盒提的,pet低拷贝,稍微多点菌提...

质粒三个条带分别对应,底:超螺旋 中:线性 上:开环。从质粒提取质量来看可能是手法有些问题,导致质粒断裂了,所以存在线性质粒和开环质粒的情况。正常提的好的质粒应该只有超螺旋一条带,你这三个带比例都1:1:1了,或许是因为提质粒的时候太多菌导致裂解不完全。
因为质粒超螺旋的结构会比正常质粒大小跑的快一些,比实际质粒大小会小一些(小的程度取决于质粒的螺旋程度),从这个角度看做双酶切的目的是将螺旋的质粒开环,那你的条带和超螺旋的就不应该一样,而是跑的更上一些!

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我思故我在
5楼2022-08-07 03:23:52
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shuaibia6

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
从大小来看是正常的
2楼2022-07-14 11:50:08
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紫魔风动

铜虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
质粒是大提还是小提?我提的浓度一直很低
3楼2022-07-14 17:28:20
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蚝油生菜

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 紫魔风动 at 2022-07-14 17:28:20
质粒是大提还是小提?我提的浓度一直很低

小提,试剂盒提的,pet低拷贝,稍微多点菌提
4楼2022-07-14 17:42:35
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