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Lea__新虫 (著名写手)
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[求助]
金黄葡萄球菌及枯草芽孢杆菌感受态细胞制备及质粒转化已有2人参与
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最近一直往金葡和枯草里导入质粒进行下一步实验，用的是ATCC6538和ATCC6633，RP4 plasmid。是不是野生型的这两种阳性菌无法形成感受态？还是宿主是阴性菌的大质粒RP4无法进入阳性菌？查了一些感受态制备方法都试过了，还是无法导入质粒。 是否用金葡RN4220和枯草WB600支撑感受态细胞的效果会更好一些？有没有虫友推荐一些易于制备感受态细胞的这两种菌？我们可以交换或者购买都行～ 还是RP4本身无法在阳性菌中存在，需要其他质粒载体或者穿梭质粒？比如pC194等？想请教下大佬们做阳性菌的转化的大多用哪种质粒比较容易转进去？我们需要质粒上带有抗生素耐药基因即可。之前一直做的是阴性菌..感觉有很多细节还不十分清楚，希望得到大神们的指点，还请不吝赐教！感激不尽！  |
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