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安徒生九日新虫 (初入文坛)
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[交流]
蓝白斑筛选，分离pGBT9和pGADT7
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各位大佬，最近我在做酵母双杂，要从酵母中提取阳性的质粒并分离，主要包含了pGADT7和pGBT9两种，由于酵母没有质粒的不相容性，直接提取会得到两种质粒的混合物，而两种质粒又都是amp抗性，也无法用抗生素分离 如图，pGBT9含有这两个domain，但是不含lacI以及lac repressor，而pGADT7载体不含lac相关基因序列，是否可以利用这个差异来筛选？转入pGBT9的在含有x gal的LB（amp抗性）平板上呈现蓝色菌落，转入pGADT7的为白色菌落，且不需要IPTG的诱导。 PS：我们实验是一直在使用贵公司的trelief 5α感受态做转化，应该跟DH5α没什么太大差异。 望解答，谢谢  微信图片_20201021222450.png |
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安徒生九日
新虫 (初入文坛)
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2楼2020-10-21 22:30:55
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