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慢病毒转染法制作稳定细胞株已有3人参与
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您好，我最近在做病毒转染相关的实验，是将一些细胞因子（如，人的ceacam，CD4，CD38，CD47等）通过慢病毒系统转染293T，使细胞因子表达在293T细胞的表面，其它都很顺利拿到了单克隆，并且验证正确，只有ceacam做了几次都没拿到正确的克隆，减小药筛浓度也没有用，加药就死的差不多了，幸免活下来的也是检测阴性的，我思考到下面几个原因，但是又都有疑惑，请大神帮我分析一下！非常感谢！ 1 基因本身没有转进去，但 293T本身并不是很难转染的细胞，并且重复了几次了 2 基因转进去了，但是表达产物会使细胞死亡 ，这种情况有什么样的思路可以解决 3 基因表达了，但是没有到细胞表面，所以检测不到，呈现阴性结果，可是与它几个细胞因子一样，我加了同样的信号肽，为什么其他的出来了，困惑  |
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5楼2019-08-14 10:46:51
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