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guoguo_fei

新虫 (小有名气)

[求助] 高效液相色谱 出现鬼峰问题分析求助!已有3人参与

大家好,我最近做HPLC的尺寸排阻(SEC-HPLC)时,遇到一个问题,就是在3min的时候会出现一个鬼峰,之前都没有这个峰,我做了几次测试,有以下结果:
1、进第一针blank(流动相)没有此鬼峰,2、接着进样品3min出现鬼峰、3、又连着进了2针blank都出现了鬼峰、4、然后又连着进了2针样品发现样品中3min时的鬼峰均消失、5、再进了两针样品,3min时又都出现了鬼峰。且这几个鬼峰的重现性很好,峰高也基本差不多,有的会高一些。
我新配置了流动相,换了柱子,换了仪器,但是此峰还是时有时无,不固定的在同一保留时间出现。

seal wash是用的10%乙腈,怀疑是进样时seal wash中溶解的脏物质带到了管路中造成的,但是换了seal wash的溶液换成了10%的甲醇,测试还是出现了鬼峰,
并且我进了两针 inject immediate sample (直接进样,针不动进样) blank里还是出现了鬼峰。
如图

请问大神能帮我想想这可能是哪出问题了吗?非常感激!谢谢!

高效液相色谱 出现鬼峰问题分析求助!
96445146992314478.jpg
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达达2011

木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by guoguo_fei at 2018-10-12 16:03:14
好的,谢谢,同一样品瓶中的样品,有时会出现此峰有时就没有,样品都是现配现用的,我一直检测这个样品,之前都没有这个峰,是最近检测才出现的。运行时间是35分钟。一开始我也以为是上针的残留。...

如果这些都排除了,那就清洗一下系统吧。
科研让生活更美好
7楼2018-10-13 08:29:50
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查看全部 10 个回答

radiochem

木虫 (正式写手)

可能是进样器污染,在引起样品污染。

发自小木虫Android客户端
2楼2018-10-11 20:23:57
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达达2011

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
考虑是不是样品测试时间短,上针的杂质峰带到后面了,延长测试时间。检查是不是系统漏气,有没有气泡。再者样品在流动相或者溶样试剂中的稳定性如何,是不是溶样时间长,物质发生了改变。现溶现做试试。
科研让生活更美好
3楼2018-10-12 09:10:02
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淡淡幽雅

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
很可能是样品里有未洗脱出来的杂质,残留至下一针或是第三针,延长分析时间考察一下
一入科研深似海,从此假日是路人
4楼2018-10-12 14:46:48
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