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【调剂】北京石油化工学院2024年16个专业接受调剂
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lirenke0324

新虫 (初入文坛)

[求助] 分子筛是否能分离150kD, 190kD, 230kD的三种蛋白组分已有2人参与

如题,分子筛是否能分离150kD, 190kD, 230kD的三种蛋白组分?如果可以,应该用什么样的柱子和参数?

非常感谢!!!!@hc-material
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maoniuniu

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

一般分子筛建议分子量相差 2 倍可以有很好的分离效果,150 kD 和 190 kD 基本是分不开的,即使用 increase 的柱子

用 Superdex200 increase 10/30 的话,0.5 ml/min,上样体积 0.5 ml,150 kD marker 在 12.9 ml,200 kD marker 在 11.9 ml,所以你的 150 和 230 可以稍微分开一点,只接峰尖的话,但效果可能也不会非常理想,降低流速,缩小上样体积(浓缩样品),可能会有一定程度的改善

但还有一种情况,就是楼主需要分离的这几种蛋白不知道是否跑过分子筛?是否一定都是单体?有时候在SDS-PAGE胶上是单体,但可能实际情况会形成多聚体,这样上分子筛就没问题,所以还要看楼主的具体情况

所以一般建议这种情况用疏水或离子交换进一步分离

祝好!
7楼2018-05-18 16:48:47
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木槿飘扬

新虫 (小有名气)

不能,分子量通常要相差2倍。可以尝试分段收峰,但不会有什么效果的。考虑其他层析方法吧

发自小木虫Android客户端
2楼2018-03-28 21:44:48
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

3楼2018-04-20 18:46:11
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xueguangpu

至尊木虫 (职业作家)

superdex 200 increase的柱子可以试试

发自小木虫Android客户端
4楼2018-04-21 08:16:50
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