| 查看: 2135 | 回复: 7 | |||
[求助]
分子筛是否能分离150kD, 190kD, 230kD的三种蛋白组分 已有2人参与
|
|
如题，分子筛是否能分离150kD, 190kD, 230kD的三种蛋白组分？如果可以，应该用什么样的柱子和参数？ 非常感谢！！！！  @hc-material |
回复此楼» 猜你喜欢
全日制（定向）博士
已经有5人回复
-
假如你的研究生提出不合理要求
已经有10人回复
-
萌生出自己或许不适合搞科研的想法，现在跑or等等看？
已经有4人回复
-
Materials Today Chemistry审稿周期
已经有4人回复
-
参与限项
已经有3人回复
-
实验室接单子
已经有4人回复
-
对氯苯硼酸纯化
已经有3人回复
-
求助:我三月中下旬出站，青基依托单位怎么办？
已经有12人回复
-
所感
已经有4人回复
-
要不要辞职读博？
已经有7人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
木槿飘扬
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2927.4
- 红花: 4
- 帖子: 148
- 在线: 48.8小时
- 虫号: 1765280
- 注册: 2012-04-19
- 专业: 生物化工与食品化工
2楼2018-03-28 21:44:48
hc-material
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +702 - BioEPI: 1
- 应助: 517 (博士)
- 金币: 462.9
- 散金: 18028
- 红花: 313
- 帖子: 3594
- 在线: 518.8小时
- 虫号: 4027804
- 注册: 2015-08-18
- 性别: GG
- 专业: 核技术及其应用
- 管辖: 生物科学
3楼2018-04-20 18:46:11
xueguangpu
至尊木虫 (职业作家)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 13919.3
- 散金: 3863
- 红花: 10
- 帖子: 3530
- 在线: 575.2小时
- 虫号: 1905451
- 注册: 2012-07-22
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2018-04-21 08:16:50
chen_xiao_xu
银虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 2394.9
- 散金: 200
- 红花: 2
- 沙发: 1
- 帖子: 411
- 在线: 30小时
- 虫号: 1343345
- 注册: 2011-07-12
- 性别: GG
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
5楼2018-04-21 10:51:25
6楼2018-05-14 15:06:23
【答案】应助回帖
|
一般分子筛建议分子量相差 2 倍可以有很好的分离效果，150 kD 和 190 kD 基本是分不开的，即使用 increase 的柱子 用 Superdex200 increase 10/30 的话，0.5 ml/min，上样体积 0.5 ml，150 kD marker 在 12.9 ml，200 kD marker 在 11.9 ml，所以你的 150 和 230 可以稍微分开一点，只接峰尖的话，但效果可能也不会非常理想，降低流速，缩小上样体积（浓缩样品），可能会有一定程度的改善 但还有一种情况，就是楼主需要分离的这几种蛋白不知道是否跑过分子筛？是否一定都是单体？有时候在SDS-PAGE胶上是单体，但可能实际情况会形成多聚体，这样上分子筛就没问题，所以还要看楼主的具体情况 所以一般建议这种情况用疏水或离子交换进一步分离 祝好！ |
7楼2018-05-18 16:48:47
小木虫科er
新虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1718.2
- 红花: 1
- 沙发: 6
- 帖子: 786
- 在线: 29.3小时
- 虫号: 6640743
- 注册: 2017-05-30
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
8楼2018-07-13 22:09:26