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分子筛是否能分离150kD, 190kD, 230kD的三种蛋白组分 已有2人参与
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如题，分子筛是否能分离150kD, 190kD, 230kD的三种蛋白组分？如果可以，应该用什么样的柱子和参数？ 非常感谢！！！！  @hc-material |
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2楼2018-03-28 21:44:48
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3楼2018-04-20 18:46:11
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4楼2018-04-21 08:16:50
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5楼2018-04-21 10:51:25
6楼2018-05-14 15:06:23
【答案】应助回帖
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一般分子筛建议分子量相差 2 倍可以有很好的分离效果，150 kD 和 190 kD 基本是分不开的，即使用 increase 的柱子 用 Superdex200 increase 10/30 的话，0.5 ml/min，上样体积 0.5 ml，150 kD marker 在 12.9 ml，200 kD marker 在 11.9 ml，所以你的 150 和 230 可以稍微分开一点，只接峰尖的话，但效果可能也不会非常理想，降低流速，缩小上样体积（浓缩样品），可能会有一定程度的改善 但还有一种情况，就是楼主需要分离的这几种蛋白不知道是否跑过分子筛？是否一定都是单体？有时候在SDS-PAGE胶上是单体，但可能实际情况会形成多聚体，这样上分子筛就没问题，所以还要看楼主的具体情况 所以一般建议这种情况用疏水或离子交换进一步分离 祝好！ |
7楼2018-05-18 16:48:47
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8楼2018-07-13 22:09:26
