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5'粘性末端的片段加A尾，做TA克隆已有2人参与
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最近拿有一个天然质粒，用三种酶随机切，切了之后跑胶确定被酶切成了不同的片段。之后要做TA克隆，想给片段加A尾。因为我用的酶切出来之后都是带有5'突出末端，所以想知道，要是加A尾的话，是不是直接用TAQ酶加A尾就行了呢？ 因为taq酶具有5'-3'的聚合酶活性，可以将5'粘性末端补平，最后在3'端加A尾，不知道这样行不行？ 另外，想问一问，在做TA克隆转化步骤中，酶切灭活后，加A尾时需要纯化酶切片段吗？加了A尾之后也需要纯化片段吗？ |
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
rrrhm: 金币+2, ★★★很有帮助 2018-01-15 13:08:42
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首先，Taq酶可以加尾，其次，加尾后用PCR纯化试剂盒纯化就行，不用切胶回收 发自小木虫Android客户端 |
2楼2018-01-15 12:30:58
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