应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » EMSA/ChIP » 求师兄师姐指教SYBR-Green1荧光定量PCR试验
91/1返回列表
查看: 1606  |  回复: 8
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

大头妞妞

新虫 (小有名气)

[交流] 求师兄师姐指教SYBR-Green1荧光定量PCR试验已有4人参与

求师兄师姐指教，
我的问题是这样的：做的是SYBR-Green1荧光定量PCR试验，原理我都看了，但是看到最后并不知我的未知样品具体怎么测，我自己的理解是，待我将我所有的QPCR反应体系和程序都优化后（标准曲线OK，标准品重复试验OK，引物特异性QPCR检测OK），那么我就将我的未知样品稀释后与我的标准品一起放在定量PCR仪上反应是吗(PS,未知样品稀释的范围在标准品之内)，是这样吗，？？？？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼2017-02-16 21:51:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

seascen2016

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
差不多，不过未知样本稀释是什么鬼？你知道怎么稀释能在标曲内?

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2017-02-16 22:01:17
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大头妞妞

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by seascen2016 at 2017-02-16 22:01:17
差不多，不过未知样本稀释是什么鬼？你知道怎么稀释能在标曲内?

那未知样品要怎么破？怎么处理才能放在和最后处理的标准品一起反应？这是我在资料上面看到的，不应该是这样吗？求指教
求师兄师姐指教SYBR-Green1荧光定量PCR试验



发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
3楼2017-02-17 09:49:01
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

贾子阳009

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你想法是对的，稀释一次如果不能在曲线内，至少会提供一个参考。那就再做一次！

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2017-02-17 18:05:18
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大头妞妞

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 贾子阳009 at 2017-02-17 18:05:18
你想法是对的，稀释一次如果不能在曲线内，至少会提供一个参考。那就再做一次！

谢谢指教，清楚了
回复此楼
5楼2017-02-17 21:30:33
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖仅楼主可见
赞一下
6楼2017-02-19 09:50:33
 已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

林志遥-14

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
理解的基本正确，可以做一次试试了

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2017-02-19 10:10:30
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大头妞妞

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wsy0914 at 2017-02-19 09:50:33
标准曲线怎么做？我那个扩增率只有80%，怎么改进？求指导...

可以问一下你的PCR反应体系都是怎么摸索的吗，我的一对95bp的引物怎么都没弄出来，求指教，要不建议，可以加你QQ私聊吗
赞一下 回复此楼
8楼2017-02-19 12:10:51
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大头妞妞

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 贾子阳009 at 2017-02-17 18:05:18
你想法是对的，稀释一次如果不能在曲线内，至少会提供一个参考。那就再做一次！

可以再请教一下，做QPCR前PCR摸索反应体系都是怎么摸索的呢，如果遇到短片段引物（95bp,上下游引物Tm相差8摄氏度）怎么处理呢，谢谢了
赞一下 回复此楼
9楼2017-02-19 12:19:52
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 大头妞妞 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件) SCI英文润色翻译-EnPapers美团队-先修改后付款
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2024杰青和万人领军什么时候会评 +5 墨香琴韵 2024-06-02 5/250 2024-06-02 19:31 by xiaqiu
[基金申请] 哎 +5 河马の史诗 2024-06-02 5/250 2024-06-02 19:05 by 328838485
[基金申请] 为什么美国要封锁华为而不封锁丘C同呢？ +6 zju2000 2024-06-02 7/350 2024-06-02 16:12 by sxjc500
[论文投稿] 没收到邮件 10+4 荣小撇 2024-05-31 9/450 2024-06-02 13:25 by bobvan
[硕博家园] 讨厌酒桌文化 +7 hahamyid 2024-05-31 7/350 2024-06-02 10:01 by 御龙老大
[硕博家园] 每到中夜，情难自抑 +34 sioc-sunj 2024-05-28 58/2900 2024-06-02 02:53 by csyky2007
[教师之家] 在大地上我们只过一生---看完我的阿勒泰上头了好几天，完结那天晚上几乎失眠 +11 瞬息宇宙 2024-05-27 13/650 2024-06-01 22:15 by otani
[教师之家] 研究生在毕业答辩时挂了，遗憾 +10 spacr2022 2024-05-27 13/650 2024-06-01 17:45 by keyaner23
[考博] 24年博士招生 +8 abinit432 2024-05-27 10/500 2024-06-01 17:38 by czp97
[考博] 24or25材料专业申博 +4 农夫三拳有点痛 2024-05-30 11/550 2024-06-01 14:45 by Napoleonsky
[硕博家园] 求问endnote上Wiley引用格式在哪下载 +3 Elon. 2024-05-30 3/150 2024-05-31 10:13 by crazy peng
[文学芳草园] 物是人非 +4 myrtle 2024-05-30 4/200 2024-05-30 15:05 by mapenggao
[论文投稿] 审稿专家比较坚定的让补充实验，但实在没法补充实验，修回还有希望吗？ (EPI+1) 3+3 qweasd12345 2024-05-29 6/300 2024-05-30 08:11 by qweasd12345
[有机交流] 液相纯度高，但产品析不太出来 10+4 cui19236 2024-05-27 9/450 2024-05-30 07:45 by yuanjijoy
[论文投稿] 《控制理论与应用》期刊收版面费吗？ +4 ygj2015 2024-05-29 4/200 2024-05-30 06:59 by nono2009
[博后之家] 2024公派博后申请 +4 326lhpqk 2024-05-27 5/250 2024-05-29 20:03 by @古月胡
[论文投稿] 有没有老师需要发表论文 +4 金老师论文助理- 2024-05-29 4/200 2024-05-29 16:51 by liuyupu132
[基金申请] 如果您是国自然评审专家 +3 丁香园账户 2024-05-28 3/150 2024-05-29 06:44 by gaohui8888
[硕博家园] 课题做到一半担心做不出来怎么办 +4 mkpooooo 2024-05-27 7/350 2024-05-27 11:56 by kanmiaolucky
[硕博家园] 周日 +6 1加油哦棒 2024-05-26 9/450 2024-05-27 10:30 by hahamyid
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭