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分类 共搜索到 342 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
分子生物 干货分享|关于质粒提取的那些事儿
虽然在强碱的条件下共价闭合环状质粒DNA也会发生变性，但两条...质粒中提得到的质粒DNA的量介于小提跟大提之间，一般用30-50ml菌液提取，提取的质粒可用于包括酶切、PCR、测序、连接、转化、...
 科研顾问_Gu 2024-05-07 06:38
分子生物 关于质粒提取的那些事儿
虽然在强碱的条件下共价闭合环状质粒DNA也会发生变性，但两条...质粒中提得到的质粒DNA的量介于小提跟大提之间，一般用30-50ml菌液提取，提取的质粒可用于包括酶切、PCR、测序、连接、转化、...
 科研实验_研实 2024-05-07 01:03
生物科学 干货分享|关于质粒提取的那些事儿
虽然在强碱的条件下共价闭合环状质粒DNA也会发生变性，但两条...质粒中提得到的质粒DNA的量介于小提跟大提之间，一般用30-50ml菌液提取，提取的质粒可用于包括酶切、PCR、测序、连接、转化、...
 超困困狗g 2024-05-07 01:58
生物科学 干货分享｜关于质粒提取的那些事儿
虽然在强碱的条件下共价闭合环状质粒DNA也会发生变性，但两条...质粒中提得到的质粒DNA的量介于小提跟大提之间，一般用30-50ml菌液提取，提取的质粒可用于包括酶切、PCR、测序、连接、转化、...
 MDL实验室 2024-05-06 09:55
生物科学 PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
(2)内切酶法：选择识别4个碱基的内切酶（如MspI和TaqI等），可同时选择几种，以克服用一种酶只能...如果重组质粒污染了标本，也不能扩增出任何条带，即使出现了扩增带，其大小也与预期的不同。...
 基础生物实验外 2024-04-15 01:54
分子生物 PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
(2)内切酶法：选择识别4个碱基的内切酶（如MspI和TaqI等），可同时选择几种，以克服用一种酶只能...如果重组质粒污染了标本，也不能扩增出任何条带，即使出现了扩增带，其大小也与预期的不同。...
 科研战神·王 2024-04-02 05:55
分子生物 PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
(2)内切酶法：选择识别4个碱基的内切酶（如MspI和TaqI等），可同时选择几种，以克服用一种酶只能...如果重组质粒污染了标本，也不能扩增出任何条带，即使出现了扩增带，其大小也与预期的不同。...
 科研战神·王 2024-02-28 12:40
生物科学 质粒提取的小技巧
双酶切制备克隆插入片段的载体，最好选择带有外源片段的质粒，是否酶切完全，从电泳条带的分子量上可以比较明确地判断。空质粒单切完全和双切完全在分子量上差异不大。在做酶切时，也可以象...
 Sh毕合生物 2024-01-25 12:04
生物科学 PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
(2)内切酶法：选择识别4个碱基的内切酶（如MspI和TaqI等），可同时选择几种，以克服用一种酶只能...如果重组质粒污染了标本，也不能扩增出任何条带，即使出现了扩增带，其大小也与预期的不同。...
 科研小努力 2024-01-06 03:20
生物科学 PCR污染处理方式
(2)内切酶法：选择识别4个碱基的内切酶（如MspI和TaqI等），可同时选择几种，以克服用一种酶只能...如果重组质粒污染了标本，也不能扩增出任何条带，即使出现了扩增带，其大小也与预期的不同。...
 科研小努力 2023-10-13 06:22
分子生物 干货分享|PCR反应污染原因追踪及污染处理方法
(2)内切酶法：选择识别4个碱基的内切酶（如MspI和TaqI等），可同时选择几种，以克服用一种酶只能...如果重组质粒污染了标本，也不能扩增出任何条带，即使出现了扩增带，其大小也与预期的不同。...
 球场下雪了 2023-10-13 01:12
生物科学 质粒提取的小技巧
双酶切制备克隆插入片段的载体，最好选择带有外源片段的质粒，是否酶切完全，从电泳条带的分子量上可以比较明确地判断。空质粒单切完全和双切完全在分子量上差异不大。在做酶切时，也可以象...
 Sh毕合生物 2023-09-21 05:49
生物科学 抗性平板有菌落，PCR扩增无目的条带
双酶切PACYCDuet1质粒，再用T4连接酶与目的基因连接构建重组质粒，转化之后发现抗性平板上有菌落，但是挑取菌落PCR扩增没有目的条带，这是哪里出问题了呢？
 小李难受 2023-09-13 03:11
生物科学 一文了解引物的相关问题
答：通常可以用EB染色的方法来判断双链DNA的量(如质粒DNA)，因为EB可以嵌合到双链DNA中。而合成的单链DNA，由于...2)无法用预先设计在引物5′端酶切位点的酶切开，特别是没有保护碱基的引物；...
 科研小努力 2023-08-14 06:21
分子生物 经验分享|一文了解引物的相关问题
答：通常可以用EB染色的方法来判断双链DNA的量(如质粒DNA)，因为EB可以嵌合到双链DNA中。而合成的单链DNA，由于...2)无法用预先设计在引物5′端酶切位点的酶切开，特别是没有保护碱基的引物；...
 球场下雪了 2023-06-15 03:26
硕博家园 酶切无条带
双酶切质粒没有条带，原始质粒有条带，各位大神帮忙求救
 人生无遗憾 2022-10-16 05:27
生物科学 关于质粒提取的小技巧
双酶切制备克隆插入片段的载体，最好选择带有外源片段的质粒，是否酶切完全，从电泳条带的分子量上可以比较明确地判断。空质粒单切完全和双切完全在分子量上差异不大。在做酶切时，也可以象...
 安静的111 2022-10-10 12:26
分子生物 双酶切
我的重组质粒转化大肠杆菌后提取质粒进行双酶切酶切位点为BamHI...有条带的第一，第二泳道为双酶切，第三泳道是BamHI的单酶切，第四是没有酶切的质粒，第五泳道是markeryoulinglywbiostar2009
 yaqian18 2022-08-16 01:01
休闲灌水 最常用的生物实验技术及原理
而待测目的基因与特异RNA探针结合后形成双链RNA,免受RNA酶的...质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当用pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性...
 略施小计 2022-08-05 08:05
医学 基础实验：教你阅读质粒图谱
那其实是代表两条DNA链,即质粒是环状双链DNA,它的启动子等在...其次ccdB(Controlofcelldeath)基因是一个可以控制死亡的基因,原理就是如果质粒没有重组成功,ccdB蛋白会破坏细菌的DNA解旋酶,从而...
 白奥思科 2022-07-20 03:24
分子生物 质粒提取电泳条带不正确
质粒大小是5000bp，但是条带只有第一次电泳正确了，后面用这管提取的质粒再次电泳一直在8000bp，没有目的条带，重新摇菌提取也是在8000bp，这是怎么回事呀用的天根质粒小提试剂盒双酶切再次...
 Hxiaopl 2022-07-18 03:28
休闲灌水 最常用的生物实验技术及原理
而待测目的基因与特异RNA探针结合后形成双链RNA,免受RNA酶的...质粒DNA的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离,当用pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时,变性...
 略施小计 2022-07-11 04:30
硕博家园 蛋白纯化求助
最近在做蛋白表达和纯化，载体是pET-28a，选用HindⅢ和BamHⅠ进行双酶切，引物设计时没有加His标签。...但是过Ni之后得到的蛋白液再跑SDS-page就没有条带，不知哪里做的不对，请教大家，感谢。
 gqc1102 2022-04-19 11:26
微生物 质粒提取及原理这些你都知道吗
在质粒DNA的应用过程中，其纯度对于酶切、PCR扩增等实验结果有着比较大的影响，因此需要保证质粒DNA提取的纯度和效率。...非常偶然的是，有时候抽提到的质粒会有7-10条带，这是由于特殊的DNA...
 北京艾柏森 2021-11-08 01:27
分子生物 两种引物都可以扩出来目的基因，酶切却没有目的基因条带是什么...
大家好我在做目的基因的重组质粒，转化后挑菌做pcr，pcr用不同的的引物都可以扩出来目的基因，到双酶切的时候却只有载体没有目的基因了，请问下各位大神这可能是什么原因呀，谢谢大家了
 张脆鹅 2021-10-10 04:16
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