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【ibidi--focus on cells】通道载玻片--新的免疫荧光方法
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细胞的免疫荧光实验是一个基础的细胞实验，传统的方法是在培养板中放入预先处理好的盖玻片，待细胞贴壁后，使用镊子将盖玻片拿出再开始进行固定，染色等系列工作。 现在分享一种简便的免疫荧光方法，无需爬片，培养-操作-镜检，在一个培养皿/载玻片上完成所有工作！一气呵成！   使用如图的培养皿和载玻片，免疫荧光步骤将简化为： 1.直接细胞培养 2.冲洗玻片/培养皿 3.固定细胞 4.冲洗玻片/培养皿 5.染色 6.冲洗玻片/培养皿 7.冻存液处理细胞 8.直接镜检观察 免去了指甲油封片的传统免疫荧光方法中的冗长步骤： 1.无需对盖玻片和载玻片消毒灭菌 2.无需对盖玻片进行包被 3.无需等细胞爬片 4.无需指甲油封片 之所能如此简便完成免疫荧光实验，是因为这些ibidi培养皿和载玻片的底部为特殊处理的材质，绝大多数细胞可以直接贴壁生长，而不需要另外包被。同时，这些耗材的底部薄如盖玻片，可以直接使用倒置显微镜进行观察，得到高质量的成像，适用于高端显微镜比如共聚焦显微镜。 成像效果：   下面再分享一种极致的免疫荧光方法，不仅更加简化实验步骤，而且可以节约试剂和细胞，同时还能得到更出色的成像效果。  http://www.thundersci.com/d/file/Applications1/cell%20culture/2016-02-25/936400f37589176cd86e56166b78402c.jpg 如图的ibidi通道载玻片，简单快速完成免疫荧光实验。 步骤：培养-固定-染色-镜检，只需在这个载玻片上进行4个步骤，免疫荧光实验轻松完成~ 优点总结： 1、节约细胞和试剂 ibidi通道载玻片里的通道只有400μm高，以μ-slide VI为例，通道的容积只有30μl，而普通8well的腔式载玻片一个孔的容积有300μl。这意味着通道需要的试剂和细胞量仅需约十分之一！对于非常珍贵的细胞和试剂来说，这可是非常重要的。  2、成像效果好 使用通道载玻片时，能在相差显微镜下获得更好的成像效果。因为通道上下都是平坦的，不会因为凹液面的折射现象影响到相差显微镜成像。而well式的开放小室的相差成像会受到培养皿盖和液面的折射现象影响。  3、细胞分布均匀 在通道载玻片中，由于没有培养皿壁的影响，铺入细胞后，不需要平时的混匀操作，细胞的分布就非常均匀了。而使用开放小室，有可能在铺细胞混匀后，细胞还是会聚集在小室的边缘或中心上。如下图所示。a 是明场相差成像，b为荧光成像。  免疫荧光本身就是个十分基础的实验，如今的科技更是便利了实验，实验也发展了科技。 以上方法分享给有需要的，奔跑在科研前沿的童鞋们~更快更省地做好免疫荧光噢！ |
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