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笨笨智慧

铁虫 (初入文坛)

[求助] 做液质之前,怎么处理掉反应物中的磷酸盐 已有2人参与

在做一个酶催化反应,以鉴定酶的功能。催化体系是在磷酸盐缓冲液中进行的,现在想做液质来鉴定有没有可能的目标产物生成,但是因为做液质不能含有非挥发性的盐类,试问我该怎么处理掉反应物中的磷酸盐呢?本人对分析外行,请大神们指导,跪谢!
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学术巨星

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

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引用回帖:
8楼: Originally posted by 笨笨智慧 at 2016-02-26 11:04:48
目标产物是含有噻唑环的一个衍生物...

1)样品上液质分析之前,应该保证它足够干净,这样能减少污染并且利于分离测定。
2)你的催化体系内除了目标化合物以外,包含磷酸盐应该还有别的杂质组分,所以应该进行下述三个步骤:
① 萃取。最简单操作是进行液液萃取,选用合适的不溶于水的有机试剂把目标化合物萃取出来。
② 净化。把萃取液净化,去除杂质,留下目标物。
③ 转底。把目标物的溶剂转换成适于液质分析的溶剂体系。可以借助旋转蒸发仪,或者氮吹浓缩仪来实现。
11楼2016-02-27 00:09:20
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hzsyzf

铁虫 (初入文坛)

一般用萃取去掉样品中的磷酸盐,液液萃取和固相萃取都有人用到。根据可能的产物极性选定萃取剂,如果不清楚产物的极性或者产物中极性非极性的都有,可以用mtbe萃取。固相萃取可选用hlb柱子富集除盐,也可用多级分步富集除盐。

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2楼2016-02-25 13:14:53
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superyeast

专家顾问 (职业作家)

如果做色质联用的话可以在方法里设定把前0.5-1分钟左右的液体直接排入废液桶即可。注意色谱的起始梯度低一些。

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3楼2016-02-25 13:27:12
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lghzg

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
笨笨智慧: 金币+2, ★★★很有帮助 2016-02-25 19:39:14
安捷伦有一个在线除盐的应用,专门针对液相前端使用含有缓冲盐的体系之后又要用质谱进行定性定量。
4楼2016-02-25 16:51:01
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