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大鼠学习无助实验方法总结
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大鼠学习无助实验方法总结 （learned helplessness in rats） 一. 基本原理： 此实验模型为一种抑郁症动物模型，当实验动物被置于一种不可逃避的厌恶刺激环境（如足电休克）时，会产生绝望行为，表现为对刺激不再逃避，并干扰了以后的适应性反应（adaptive responding）。此时动物脑内儿茶酚胺水平降低，被公认为是一种抑郁状态，而抗抑郁药可以对抗这种状态。 二. 操作步骤： （一）实验配置： 1.雄性大鼠，180-220g 2.大鼠穿梭箱（梭箱有两室，每室30cm*20cm*30cm，中间通路7cm*7cm，可以人为开闭，箱底为不锈钢栅条，条间距离为1cm，两室的栅条可以分别通电，当其中一室与刺激器接通时另一室则为安全室） 3.计算机信号分析装置 （二）实验步骤： 第一天：将动物分组，第一天进行不可逃避的电休克即制作前休克动物（pre-shocked annimals）。具体做法是将穿梭箱的中间通路关闭，将动物放入箱内通过底部的电栅条接受0.8mA*15s的足部电刺激（有报道0.4mA*10s），每分钟一次，共60次，总的刺激时间为15min。非前休克动物（nonpreshocked annimals）只放入箱内而不进行电刺激，时间相同。 第二天：第二天开始给药，采取一周慢性给药方法，如果剂量较大可以每天分次给药。（参考药物剂量：去甲丙米啨每天10mg/kg和20mg/kg与对照组比可有显著性，并呈量效关系。）最后一次给药后24h，进行条件回避实验（conditioned avoidance testing），将动物放入穿梭箱适应5s，然后进行实验，条件刺激为铃声，非条件刺激为足电休克0.8mA，在铃声3s后开始刺激，当动物逃到安全室后停止铃声和刺激，如未能逃避时刺激达30s时停止。每min一次，共进行30次，刺激间隔27s。 如果动物在铃声开始的3s内逃到安全室，记录主动回避成功一次，逃避潜伏期为0，刺激后才逃避者其潜伏期记录是从刺激开始到逃避完成的时间，到最后未能逃避者，则潜伏期为30s。 三. 注意事项与评价 临床上有些病人的发病原因也属于这种学习无助状态，所以此实验模型的可信度比较高，对于增高脑内儿茶酚胺的药物筛选及研究有一定的价值。测定指标是回避成功次数和逃避的潜伏期（latency to escape），由上海欣软信息科技有限公司自主研发的SuperAPAS软件可以自动进行记录和分析，避免了以往手动记录的不方便性和不准确性。实验装置也可以采用跳台或压杆方法来终止电刺激。 |
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