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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 玉米胚提取DNA
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【悬赏金币】回答本帖问题，作者卫小誊将赠送您 5 个金币

卫小誊

铁虫 (初入文坛)

[求助] 玉米胚提取DNA

看到一篇文献“适用于SSR分子标记的玉米单粒种子DNA快速提取新方法”中，DNA提取步骤中有PH=2.0的TE缓冲液。想请问各位大神，有没有知道怎么配的。
步骤：DNA提取 将每一粒干种子的胚取下分别放入96孔深孔板中每孔加入150ul提取液(0.1MNaOH,0.01%溴酚蓝) 盖上封口膜沸水加热5分钟，然后每孔分别加入150ulTE缓冲液（PH=2.0） 放在4度冰箱保存备用。
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1楼2016-02-21 12:19:53
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轩辕漪

禁虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-02-21 22:29:58
本帖内容被屏蔽
2楼2016-02-21 14:04:21
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卫小誊

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 轩辕漪 at 2016-02-21 14:04:21
第一次做没有详细的实验步骤，和试剂配方，很难成功的。楼主试试CTAB的方法

好的，谢谢、
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3楼2016-02-21 16:42:34
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鲨鱼宝宝

新虫 (小有名气)
缓冲液的典型配方是：

10 mM Tris，使用HCl将其pH调成8.0
1 mM EDTA
TE缓冲液通常被称为T10E1缓冲液，读成“T十E一缓冲液”。如需配制100 mL的T10E1缓冲液，只需加入1 mL的1 M Tris-HCl（pH 8.0）和0.2 mL的EDTA（0.5 M）以双蒸水定容到100mL即可。

维基百科摘录

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4楼2016-02-23 02:14:26
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star013

新虫 (知名作家)
我们公司有这种试剂盒和说明书，您需要么？

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5楼2016-02-24 08:34:41
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ljsxbs

铜虫 (初入文坛)
为什么不用试剂盒呢？是和课题有关？
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实验顺利
6楼2016-02-24 09:00:30
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卫小誊

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by ljsxbs at 2016-02-24 09:00:30
为什么不用试剂盒呢？是和课题有关？

因为本科生实验，就做五个材料，所以没有买试剂盒
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7楼2016-02-24 10:55:43
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卫小誊

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 鲨鱼宝宝 at 2016-02-23 02:14:26
缓冲液的典型配方是：
10 mM Tris，使用HCl将其pH调成8.0
1 mM EDTA
TE缓冲液通常被称为T10E1缓冲液，读成“T十E一缓冲液”。如需配制100 mL的T10E1缓冲液，只需加入1 mL的1 M Tris-HCl（pH 8.0）和0.2 mL的EDTA（0 ...

这个我知道，实验室的TE就是这样配置的，但是文献上面说的是PH为2.0，这个TE肯定不是2.0的，所以我就想问问，PH2.0的TE怎么配或者用什么来调PH，是用盐酸吗？害怕配错 ，所以想确认下。
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8楼2016-02-24 10:58:06
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鲨鱼宝宝

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 卫小誊 at 2016-02-24 10:58:06
这个我知道，实验室的TE就是这样配置的，但是文献上面说的是PH为2.0，这个TE肯定不是2.0的，所以我就想问问，PH2.0的TE怎么配或者用什么来调PH，是用盐酸吗？害怕配错 ，所以想确认下。...

你确定这个pH 对吗？如果真对就加1M或者5M盐酸调.

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9楼2016-02-24 19:58:04
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