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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请问大家电转大肠杆菌用到的水是什么水呢？
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xxh8372

荣誉版主 (文坛精英)

小木虫微笑研究僧

[交流] 请问大家电转大肠杆菌用到的水是什么水呢？

准备做电转，看到有的文献说所用的水是超纯水，但是好像我们没有这个技术达到那么高的标准，请问用双蒸水或者去离子水可以吗？

谢谢大家！
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____/\~~~/\,----(..)/\____//|(\|(^\/___\/\||__||__|-"
1楼 2008-10-08 16:30:32
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bobword

金虫 (小有名气)
★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 7-26 08:51
用了三年灭菌的去离子水做JM109的感受态细胞，结果都还不错，接近Takara卖的水平。质粒加的比较少，难度大的连接感受态细胞就浓一点。曾经也用过双蒸水做过，没有明显的不同，就是电转时比较放心一些。心理因素而已。
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10楼2008-10-09 16:45:32
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sumertansy

铜虫 (小有名气)
★ ★
司马诸葛(金币+2,VIP+0):谢谢交流 7-26 08:50
有超纯水就用超纯水，没有就用双蒸水或者去离子水。没有什么可不可以。
关键是电转时，离子强度高会爆杯。
所以要控制离子强度，我们用18.2兆欧的水当然好。没有的话，也可以。做电转细胞时，洗完后点击下，如果1250/cm不爆杯，点击时间达到4.5-5ms那就好了。
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2楼2008-10-08 17:12:11
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hyf9901

铁杆木虫 (著名写手)
★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 7-26 08:50
最好用超纯水，去离子水不就是超纯水吗，哈哈哈哈

没有买一瓶，才几十快钱

电转注意些，质粒要少，要绝对纯，尽量较少离子浓度，

2000V左右，注意安全哈

没有经验带个钢盔，CS和电转两全其美

如果砰的一声，那就意味着失败啦火花四溅，不是金蛋哟，

不是幸运52和6+1哟

要有勇气，好歹可以提高心脏承受力

[ Last edited by hyf9901 on 2008-10-8 at 17:37 ]
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滴自己的汗，吃自己的饭，自己的事情自己办，不抱怨，不诉苦，走一步，是一步，一路朝前不回头，死到哪站算哪站
3楼2008-10-08 17:30:38
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sumertansy

铜虫 (小有名气)
不要紧， 现在的电转仪基本都防爆
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4楼2008-10-08 19:26:46
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