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gaoyu_8848金虫 (小有名气)
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[求助]
miRNA，mRNA，蛋白质之间表达的关系求助已有1人参与
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大家好， 我的研究方向是生理学，先进行的real－time PCR检测A基因在不同个体中的表达差异，个体2是由个体1发育而来。结果A基因在个体1中的表达显著低于个体2中表达，这个结果经过半定量，real－time PCR和转录组测序都相互证实。第二步用western blot进行A基因对应的A蛋白在不同个体中的表达差异，结果A蛋白在个体1中的表达显著高于个体2中表达。基因表达与蛋白表达结果不一致，推测中间可能有miRNA参与调控，随着进行了miRNA高通量测序，发现其中一些基因靶向A基因，结合与A基因的3‘UTR区域，通过双荧光素酶体外实验证明其中一个miRNA与A基因存在3’UTR的结合位点，但是通过miRNA的表达量发现，miRNA中的表达量在个体1中高于个体2中。总结：从个体1到个体2的过程中，A蛋白表达降低，靶miRNA表达降低，A基因表达升高。 疑惑的是，miRNA应该主要是抑制翻译水平，但是本次试验蛋白表达与miRNA表达趋势一致，而与转录水平表达相反，该如何解释？ 谢谢 |
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