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annali

[交流] 请求“单细胞凝胶电泳”实验技术的相关资料

请求“单细胞凝胶电泳”实验技术的相关资料。第一次做相关的试验,高手由什么建议都发表一下!!无限感激!!!
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sprinkle62

我在06年底在我们实验室建的Comet Assay这个技术,做了不少片子,并且去天津的医学科学院也学习了解了他们的技术方法,略有些心得吧。
首先你得明确你是要检测哪种类型的DNA损伤,中性电泳和碱性电泳是不一样的,中性条件检测双链断裂,而碱性条件检测单链断裂。
确定之后就是准备试剂和buffer,然后你可以用普通的皮实一些的细胞,比如Hela等,在H2O2的浓度梯度处理情况下做一些实验,建立你的实验体系,同时也可以让你对这个技术有具体了解,知道结果会是什么样的。
Comet Assay最后的染色有几种方法,我们老板以前从美国带回来的Trevigen的盒子我记得是SYBR Green染的,不过我没用过;现在我的体系都是PI染的,然后荧光显微镜下看、照相、做统计分析。

先去做实验了。。。有什么问题再问然后我再回答吧~
2楼2008-10-07 16:15:28
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