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谁能告诉我辣根过氧化物酶的DNA序列呀？截至日期2008/10/15
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我想要知道辣根过氧化物酶的DNA序列，谁能告诉我呀？我在NCBI上怎么查不到呀？怎么查？ 辣根过氧化物酶（Horseradish peroxidase） 是从辣根（Horseradish，Armoracia rusticana）中提取出来的酶。 [ Last edited by wlhlihong on 2008-10-7 at 19:36 ] |
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5楼2008-10-08 10:16:21
cnki检索结果 不知能否提供参考
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辣根过氧化物酶基因与血管内皮生长因子基因的连接及克隆 【英文篇名】 Linkage and Cloning of Genes Encoding Horseradish Peroxidase and Vascular Endothelial Growth Factor 【作者中文名】 邵金辉; 潘继红; 朱有名; 吴围屏; 吴坚美; 王志宇; 【作者英文名】 SHAO Jin-hui; PAN Ji-hong; ZHU You-ming; et al（Shandong Medicinal Biotechnology Centre; Key Laboratory for Biotech-Drugs Ministry of Health; Jinan 250062; China）; 【作者单位】 山东省医药生物技术研究中心国家卫生部生物技术药物重点实验室; 山东省医药生物技术研究中心国家卫生部生物技术药物重点实验室 （济南250062）; （济南250062）; 【文献出处】 中国生物制品学杂志, Chinese Journal of Biologicals, 编辑部邮箱 2007年 12期 期刊荣誉：ASPT来源刊 CJFD收录刊 【关键词】 辣根过氧化物酶; 血管内皮生长因子; 连接; 克隆; 毕赤酵母; 【英文关键词】 Horseradish peroxidase; Vascular endothelial; Linkage; Cloning; Pichia pastoris; 【摘要】 目的连接辣根过氧化物酶(HRP)基因与血管内皮生长因子(VEGF)基因并进行克隆。方法用RT-PCR法从人肺肿瘤组织获得VEGF165基因,从含有HRPC3基因的质粒pMDC3EX中扩增得到HRPC3基因,将两种目的基因通过连接肽相应DNA序列进行连接,再以带有特定酶切位点的引物进行PCR,然后将目的基因插入到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,构建重组质粒,在大肠杆菌中克隆,并进行序列分析。再将重组质粒转入毕赤酵母中,筛选阳性克隆,提取基因组DNA,采用PCR法鉴定。结果用PCR扩增的VEGF165基因和HRPC3基因片段与预期相符,将二者连接后,克隆到pPIC9K质粒中,经DNA测序证明重组基因与公开发表的相同DNA同源性为97.3%。经PCR鉴定,目的基因已转入毕赤酵母中。结论已成功将辣根过氧化物酶基因与血管内皮生长因子基因连接并克隆。 |
2楼2008-10-07 14:04:10
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wlhlihong(金币+2,VIP+0):谢谢了。如果我要进行PCR，引物如何设计？
wlhlihong(金币+2,VIP+0):谢谢了。如果我要进行PCR，引物如何设计？
3楼2008-10-07 15:25:02
ningqiu2001
银虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 235.3
- 帖子: 52
- 在线: 55.8小时
- 虫号: 458738
- 注册: 2007-11-13
- 专业: 样品前处理方法与技术
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它是一条由308个氨基酸组成的肤链，含有4个二硫键，分别位于 Cysll-91、Cys44-49、Cys97-301和Cys177-209;同时还有一个由Asp99和Arg123组成的盐桥。肤链主连上有9个糖基化位点. 参考文献: Welinder KG.FEBS Lett，1976，72(1):19－23 曾家豫.HRP基因的表达、进化及其催化苯胺类化合物聚合反应的研究.2007博士论文 【英文题名】 The Expression、Directed Evolution of HRP Gene and the Enzymatic Polymerization of Aniline or Its Derivantes 不给＋金 对不起我给你查半天  |
4楼2008-10-07 15:42:20