| 查看: 436 | 回复: 0 | |||
redking2012木虫 (正式写手)
|
[交流]
荧光蛋白报告基因在基因组编辑中的作用
|
|
最近在想一个问题关于怎么更加高效的使用荧光蛋白报告基因来更快的筛选出编辑正确的细胞。通常我们在细胞内过表达zinc finger或者talen 和crispr cas9，以及靶标导向的元件，通常我们可以给细胞提供一个供体质粒：带有两个同源臂，同源臂上带有想要引入的突变，同源臂之间带有荧光蛋白标签。通过同源臂重组，突变被引入基因组，同时荧光蛋白报告基因也被引入基因组，通过流式细胞筛选带有荧光的单细胞，这种方法可以快速富集编辑成功的细胞。那么我们可不可以同时构建两个供体质粒，分别带有不同荧光，流式细胞筛选带有两种荧光的细胞，这种细胞理论上应该是两个拷贝都被成功的编辑了。 另外我想问问大家，过多的荧光筛选对细胞有什么伤害，这种筛选出来的细胞发表论文的时候，审稿人会不会怀疑该方法的安全性？ 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
膀胱癌靶向治疗新选择：厄达替尼作用机制与耐药研究进展
已经有0人回复
-
从水母到实验室：腔肠素的发现历程与生物发光奥秘
已经有1人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有142人回复
-
线粒体氧化磷酸化的新靶点：S-Gboxin的发现与研究进展
已经有0人回复
-
PROTAC药物开发选择VHL配体：MDK-7526以87%出口向量占有率成首选
已经有0人回复
-
MCC950：NLRP3炎症小体特异性抑制剂的科研应用与前景
已经有0人回复
-
康替唑胺研发17年：如何解决多重耐药菌感染难题
已经有0人回复
-
伊曲莫德（Etrasimod）从“肠道免疫失控”到精准靶向干预
已经有1人回复
-
西达本胺：创新HDAC抑制剂的抗肿瘤之路
已经有0人回复
-
金色抗生素单硫酸卡那霉素的物化性质、制备与前景
已经有0人回复