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xmc!.

金虫 (正式写手)

[求助] 【SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳】+【有效期至2008年10月10日】

做SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳时,蛋白条带尚可分开,但脱色时,条带颜色会褪去,越来越模糊了,很郁闷,请问大牛们有何高见?谢谢,有金币奖励。

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beckham277

木虫 (职业作家)


xmc!.(金币+1,VIP+0):谢谢
估计你的二抗有问题
2楼2008-10-06 20:04:43
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xmc!.

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by beckham277 at 2008-10-6 20:04:
估计你的二抗有问题

谢谢。
我做的是普通蛋白电泳,不用一抗二抗。就是样品中蛋白提取后直接上样,是粗蛋白电泳。
3楼2008-10-06 20:25:58
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platto

木虫 (著名写手)

一窍不通


xmc!.(金币+1,VIP+0):谢谢
你用什么试剂进行的脱色,可能是脱色时间过长了,把考马斯亮蓝洗掉了。你可以试着用银染的方式,这样灵敏度更高。
七窍通了六窍
4楼2008-10-06 21:04:47
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xmc!.

金虫 (正式写手)

我的染色剂是考马斯 R250,脱色液是 80ml 乙酸+250 ml 乙醇,用水定至1000ml.
5楼2008-10-06 21:53:32
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fjc100648

金虫 (小有名气)

脱色时间长了。能看见条带后换用水继续脱,能使条带清晰些。
6楼2008-10-11 17:00:10
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ningjia005

铜虫 (初入文坛)

99

最近在做氟西汀实验   但每次第一部反应苯乙酮都反应不完,我是按照你的文献方法加的,先把一甲氨盐酸盐用甲醇溶清,再加多聚甲醛,回流一小时,Dropwise苯乙酮,反应6小时, 一甲氨盐酸盐肯定过量,多聚甲醛多加了还是反应不完苯乙酮,为什么?是因为加的顺序不对吗?我做了好几次,有时候反应一天都反应不完苯乙酮.困惑中......
欢迎互相交流文化
7楼2008-10-11 18:34:25
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