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Stridegogogo

捐助贵宾 (小有名气)

小可爱

[求助] 请问HPLC A泵B泵 流经柱子及Purge问题 已有2人参与

A泵在 碳酸氢铵里
B泵在 水里。
色谱柱洗脱目的产物用的是A泵中的碳酸氢铵
但是最终 色谱柱要保存在乙醇,但是由于本来里边是碳酸氢铵,必须先冲水,把水冲出来再换成乙醇冲,也就是碳酸氢铵绝对不能在柱子里直接被乙醇冲。
那么问题来了。
我先用B泵冲水
再把B泵放在乙醇里冲乙醇。
可以吗?
最后用完了 把A泵从碳酸氢铵李拿出来也放在乙醇里 然后Purge 可以吗
请问Purge是什么功能。我把那个圆的按钮拧成竖直的是不是 Purge的时候就可以完全把系统不经柱子而换液呢?
谢谢各位大神,我一直不太明白每次Pugre 拧来拧去的到底是为什么

请问HPLC A泵B泵 流经柱子及Purge问题
IMG_1854.JPG
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分子克隆与蛋白结晶
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月光晒谷

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
Stridegogogo: 金币+15, ★★★很有帮助, 谢谢!!!! 2016-01-28 11:25:07
柱子是冲好了,每次实验完成,你要冲洗的不单是你的柱子还有系统。,你这个做法A管路中还是盐,一是生菌,二是别人万一直接用高浓度有机相有可能析出。purge打开后经过泵直接去废液,不走后面的管路。你如果不打开,会超压报警,因为流动相经泵后流不出去。perge的目的一是排气排,二是流动相灌注管路,替换原来流动相。
2楼2016-01-27 15:14:00
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赈早见琥珀主

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Stridegogogo: 金币+15, ★★★很有帮助, 谢谢!!!! 2016-01-28 11:25:18
楼上说的挺好,稍微补充一点点。
首先,应该明白整个液相系统中流动相的流经顺序是流动相瓶子——泵——色谱柱——检测器。排气泡的目的是将管路中的气泡给排除出去,如果流速比较低的话气泡很可能滞留在管路路面出不去,所以一般排气泡都要求有3ml/min甚至更高的流速。那么问题来了,如果连着柱子,在这么高的流速冲击下,仪器超压报警还是小事,色谱柱冲塌了怎么办?检测器冲坏了怎么办?所以purge阀就在这里起作用了,purge阀将泵和色谱柱之间的管路断开,流动相在经过泵后直接被排出进入废液瓶,自然就不会影响到色谱柱和后面的检测器了。
你图中圆圆的阀门竖过来就是purge阀关闭,流动相经泵到色谱柱,横过来就是purge阀打开,流动相经泵直接排出。但有一点请注意,一般purge阀不要拧过度,拧横过来就可以了,不要再往下拧了,不然可能会有其他比如漏液的情况发生。
铁甲依然在
3楼2016-01-27 16:36:22
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