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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 1号蛋白25KD, 2号蛋白24KD, 但是做WB时
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杨仔儿

木虫 (著名写手)

[求助] 1号蛋白25KD, 2号蛋白24KD, 但是做WB时 已有2人参与

1号蛋白25KD,   2号蛋白24KD,  但是做WB时，本应该2号蛋白在1号蛋白下边，可是却正好相反，这是问什么？ 求解答？
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1楼 2016-01-25 15:33:07
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swlsangon

木虫 (小有名气)

快乐的木虫

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
杨仔儿: 金币+10, ★★★很有帮助 2016-01-25 17:56:30
这两个蛋白分子量基本没差别的，在膜上基本是分辨不出差别的，在跑胶时可能会出现你遇到的情况，如果不是相差太大的话，是正常情况。
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生命在于运动
2楼2016-01-25 16:17:46
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杨仔儿

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by swlsangon at 2016-01-25 16:17:46
这两个蛋白分子量基本没差别的，在膜上基本是分辨不出差别的，在跑胶时可能会出现你遇到的情况，如果不是相差太大的话，是正常情况。

差别是不大，条带位置不对之前我以为是我的操作问题，后来做几次都是这个结果，有点不明白，能不能是蛋白的一些结构或者其他什么影响着他的位置？

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3楼2016-01-25 16:40:02
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zhang001zh

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
蛋白的形状什么的也会在跑胶时造成一定的影响  其次蛋白可能因为糖基化磷酸化什么的原因和理论分子量产生一定的差别，你的两个蛋白分子量差距不大，有一定可能性跑成这样。
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杨仔儿
4楼2016-01-25 16:56:28
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mlbiosci

新虫 (正式写手)
生物药物研究时，跑胶出来的范围可以是理论值正负百分之十

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杨仔儿
5楼2016-01-25 17:00:25
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杨仔儿

木虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by zhang001zh at 2016-01-25 16:56:28
蛋白的形状什么的也会在跑胶时造成一定的影响  其次蛋白可能因为糖基化磷酸化什么的原因和理论分子量产生一定的差别，你的两个蛋白分子量差距不大，有一定可能性跑成这样。

啊，谢谢了

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6楼2016-01-25 17:57:12
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杨仔儿

木虫 (著名写手)
送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by mlbiosci at 2016-01-25 17:00:25
生物药物研究时，跑胶出来的范围可以是理论值正负百分之十

原来这样啊，谢谢

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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7楼2016-01-25 17:57:29
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兽医小学生

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
1楼: Originally posted by 杨仔儿 at 2016-01-25 15:33:07
1号蛋白25KD,   2号蛋白24KD,  但是做WB时，本应该2号蛋白在1号蛋白下边，可是却正好相反，这是问什么？ 求解答？

首先你是用的什么表达系统？如果是真核表达系统，蛋白质存在加工修饰，如糖基化就是典型，有可能造成分子变化（一般变大）。其次由一些不确定因素造成：转膜过程中胶发生变形、移位。建议楼主先从理论上分析蛋白分子量差别，再从操作上对应。我能想到的就这么多啦

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8楼2018-12-19 11:12:47
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