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雨_轩木虫 (正式写手)
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滴定法测定脂肪酶酶活的问题 已有1人参与
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| 各位好，想问一下，基于滴定法测定脂肪酶酶活要求加入4%的聚乙烯醇作为乳化剂，但是，我看文献都是用水溶解，为什么不是用对应的缓冲液溶解呢？有没有特别的说明呢？有对应的生产脂肪酶的测定国家标准方法，但是，用于中药领域脂肪酶抑制剂活性成分活性筛选时，也必须完全用这种方法么？个人感觉是有问题的呀，比如国标中加入5ml缓冲液，4ml底物乳化液，这都是定数，底物是不是足量，反应10min后，应该是已经达到了平衡了吧，我做了两次，结果进行酶浓度考察、底物浓度考察时，发现底物浓度始终是不足量的啊！！，我用的是sigma的猪胰腺脂肪酶。另外最适pH、温度是多少呢？并不是参考文献的7.4、37℃啊，我做的是7.7,42℃啊！求教！！ |
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