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雨_轩木虫 (正式写手)
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[求助]
滴定法测定脂肪酶酶活的问题 已有1人参与
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| 各位好,想问一下,基于滴定法测定脂肪酶酶活要求加入4%的聚乙烯醇作为乳化剂,但是,我看文献都是用水溶解,为什么不是用对应的缓冲液溶解呢?有没有特别的说明呢?有对应的生产脂肪酶的测定国家标准方法,但是,用于中药领域脂肪酶抑制剂活性成分活性筛选时,也必须完全用这种方法么?个人感觉是有问题的呀,比如国标中加入5ml缓冲液,4ml底物乳化液,这都是定数,底物是不是足量,反应10min后,应该是已经达到了平衡了吧,我做了两次,结果进行酶浓度考察、底物浓度考察时,发现底物浓度始终是不足量的啊!!,我用的是sigma的猪胰腺脂肪酶。另外最适pH、温度是多少呢?并不是参考文献的7.4、37℃啊,我做的是7.7,42℃啊!求教!! |
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