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yefei147

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR检测图片结果分析 已有3人参与

甜柿果实双酶切后，接头连接,     接着预扩增，最后用引物选择性扩增，之前选扩很亮，然后稀释很大比例，再做还是那么亮，求虫友帮忙，谢谢

PCR检测图片结果分析


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1楼 2016-01-20 22:30:19
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骆明亮

新虫 (小有名气)
★
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这次实验是对甜柿果实甲基化分析，用MSP   HAPII 及EcoRI双酶切，然后接头连接，再进行预扩增，预扩增后进行选择性扩增，预扩增体系15ul稀释10倍取30ul稀释到到60ul取1ul选择性扩增，结果太亮啦。后来稀释到300ul但是依然很亮如图，求虫友解救

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2楼2016-01-20 22:51:51
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长红

铁虫 (初入文坛)
★
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最好设置阴性对照吧！
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3楼2016-01-21 15:44:39
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你是路人甲

铜虫 (小有名气)
★
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是模拟体内DNA的天然复制过程，在体外扩增DNA分子的一种分子生物学技术，主要用于扩增位于两段已知序列之间的DNA区段。在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物，经变性、退火和延伸若干个循环后，DNA扩增2ⁿ倍，我们现在主要采用BIOGHC染料法荧光定量PCR和BIOGHSC探针法荧光定量PCR
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4楼2020-03-17 09:15:34
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