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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 一个酵母双杂交自激活验证的小白问题
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abczhuazhua

铜虫 (初入文坛)

[交流] 一个酵母双杂交自激活验证的小白问题 已有6人参与

请问自激活验证是不是只对转录因子这类蛋白才需要的，如果不是转录因子的话，是不是可以直接连在BD上，不用验证的？

我现在要做两个蛋白的互作，蛋白S是转录因子，蛋白T不是转录因子，我可不可以将S连在AD上，T连在BD上，这样是不是就不用考虑自激活的问题了？

多谢~
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1楼 2016-01-19 17:40:40
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generalel

金虫 (小有名气)
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引用回帖:
7楼: Originally posted by abczhuazhua at 2016-03-02 15:03:52
谢谢喔。我做的是已知蛋白喔。就是说非转录因子也存在自激活问题咯？为什么呀。...

一般来说，只有转录因子有激活结构域。再说，你验证蛋白的活性，实验很简单，何必省略。

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8楼2016-03-02 15:08:21
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普通回帖

时光检索

金虫 (小有名气)
★
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都做一下吧，你是做的已知的蛋白，还是筛库

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2楼2016-01-19 23:06:51
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abczhuazhua

铜虫 (初入文坛)
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2楼: Originally posted by 时光检索 at 2016-01-19 23:06:51
都做一下吧，你是做的已知的蛋白，还是筛库

是做已知蛋白的，就是在模式植物上已经确认的关系，在我研究的植物上的同源基因也做一下看一致否。
当然知道，都做一下，那样就不用问啦，对吧，谢谢啦。
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3楼2016-03-01 13:02:52
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Neo2000

木虫 (著名写手)
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必须做的，自激活过了才能做下一步啊

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4楼2016-03-01 15:26:25
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abczhuazhua

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by Neo2000 at 2016-03-01 15:26:25
必须做的，自激活过了才能做下一步啊

我晕了啊，要是有自激活活性，不是就不能用这个酵母双杂的系统来研究这两个蛋白的互作问题了吗？
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5楼2016-03-01 21:19:00
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generalel

金虫 (小有名气)
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必须做，不然结果不可信。有自激活，只有去除激活区再做酵母双杂。

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6楼2016-03-01 23:38:41
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abczhuazhua

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by generalel at 2016-03-01 23:38:41
必须做，不然结果不可信。有自激活，只有去除激活区再做酵母双杂。

谢谢喔。我做的是已知蛋白喔。就是说非转录因子也存在自激活问题咯？为什么呀。
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7楼2016-03-02 15:03:52
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xiaojiu689

新虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by generalel at 2016-03-01 23:38:41
必须做，不然结果不可信。有自激活，只有去除激活区再做酵母双杂。

你好，请问转录因子激活区怎么确定？我想去除它
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9楼2018-05-21 10:17:53
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1141209419

新虫 (初入文坛)
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8楼: Originally posted by generalel at 2016-03-02 15:08:21
一般来说，只有转录因子有激活结构域。再说，你验证蛋白的活性，实验很简单，何必省略。
...

请问大神，怎么确定转录因子的激活结构域

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10楼2018-07-30 11:58:38
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