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[求助]
土壤narG、napA基因怎么都扩增不出来，请大神们帮帮忙，谢谢谢谢
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| 想问一下有人做过narG这个功能基因吗，我最近用1960f（5-TAY GTS GGC CAR GAR AA-3）/2659r（5-TTY TCR TAC CAB GTB GC）PCR扩增（650bp），25ul体系引物各1.25ul（10umol/L），Taq酶0.1/0.25都试了，模板2ul（pcr 16S很亮），程序是95℃ 5min，94℃ 30s，59℃ 30s，72℃ 45s；前8个循环每个循环降0.5℃，后30个循环55℃；最后72℃ 6min，做了梯度PCR（47-60℃），可还是什么都没p出来；还试了一下pcr的mix，只有很亮的引物二聚体，麻烦各位大神帮我找找原因，或者有谁做过这个功能基因告诉我一下您的条件，谢谢谢谢；我还想做napA，有人知道的话也可以告诉我一下经验。。。 |
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