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alexing

[交流] 急问,大量DNA沉淀的问题

各位虫友,本虫在用PCR大量扩增一段长400+bp的目的片段,需要量非常大,经过很多管PCR(100uL*80管)合并,想得到100uM左右的DNA溶液,但乙醇沉淀后重新溶解时有大量沉淀不能溶解,咋解决?
双链DNA的溶解度是多少?谢了先
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chenliang_0513

铁杆木虫 (职业作家)

也许你沉淀不是DNA造成的,
乙醇里面其实也有很多杂质的,有好一点的也许就没有了
不过合成的引物里面也往往有白色沉淀,似乎也可以忽略
注意:当NaCl在水中的浓度为0.014mol/L时DNA的溶解度最低
所以用去离子水或者加盐也许可以解决

你也可以用胶回收尝试一下提高DNA的浓度
我本将心向明月,奈何明月照沟渠?
2楼2008-10-03 09:05:15
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