| 查看: 161 | 回复: 2 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
[交流]
请教一下关于沉淀蛋白的问题
|
|||
|
我的样品是血液以及组织样品，根据文献方法，需要先用Triton溶液匀浆破碎，然后用终浓度5%的磺基水杨酸沉淀蛋白，然后HPLC测量药物浓度。 但我实验中发现，用磺基水杨酸沉淀蛋白似乎效果非常差。加酸混匀以后，离心出来的上清是褐色的，颜色很深，特别是血液以及血液含量丰富的器官比如肝脾。也许还有乳化问题，上清在冰箱静置过夜以后会再次出现大量沉淀，颜色会略变浅，但还是很深。离心进样后杂峰非常得多。 又作了2倍体积的甲醇沉淀方法，处理后样品颜色是略微淡黄色，要浅很多，冷冻后也没有再次出现沉淀，跑HPLC杂峰也要少很多。 但问题是我的样品的药物浓度已经比较偏向检测下限，如果用甲醇沉淀法，会再次稀释样品，而且甲醇法的药物回收率只有40%上下。用酸沉淀法不会稀释样品，回收率有60%多。 请教一下，酸沉淀血液样品蛋白，这种现象是否正常，能否改进？我是否还应该用这种方法处理样品？ |
回复此楼» 猜你喜欢
085501机械专硕 302分 不挑专业求调剂
已经有3人回复
-
332，085601求调剂
已经有7人回复
-
292求调剂
已经有7人回复
-
314求调剂
已经有17人回复
-
一志愿中国科学院上海有机所，有机化学356分找调剂
已经有6人回复
-
291求调剂
已经有8人回复
-
考研二轮调剂
已经有4人回复
-
262求调剂
已经有13人回复
-
调剂
已经有17人回复
-
268分085602化学工程调剂
已经有14人回复
platto
木虫 (著名写手)
一窍不通
- ACI: 4
- 应助: 12 (小学生)
- 贵宾: 0.139
- 金币: 6073.4
- 红花: 4
- 帖子: 1158
- 在线: 53.6小时
- 虫号: 184569
- 注册: 2006-02-14
- 性别: GG
- 专业: 色谱分析
2楼2008-10-02 15:20:10
3楼2008-10-03 21:41:55
