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超表达和干扰后通路检测不一致怎么办?
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超表达和干扰蛋白A后,表型基因D有相互印证的变化,然后通过阅读文献发现A可以通过增加ERK1/2的磷酸化影响细胞增殖,我就检测了ERK1/2的磷酸化,结果干扰掉A基因后,磷酸化确实是下降的,但是超表达却没什么变化,超表达做了好多次,ERK1/2的磷酸化一直没有变化,我就是想证明A→pERK1/2→D这个简单的机制,却做不出超表达效果。现在这种情况该怎么办?是不是这个机制是不成立的? 关于A基因的文献太少,能提供的线索很少,如果不是通过ERK1/2,那该怎么研究A作用到D的机制呢?有什么具体的实验方案,请大神指教一二,谢谢! |
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