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ch94031158木虫 (小有名气)
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[交流]
[求助]+柱层析时组分洗脱不下来
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我分离的样品不是药物的目的，但是知道药分版由很多层析的高手，故特来求教。 总脂提取物中定量分析中性脂（植物提取物，其中含有多种色素和极性脂），用硅胶60A 细长柱，氯仿洗脱，在先前的实验中可以很好的洗脱出中性脂（含少量类胡萝卜素），保留极性脂和叶绿素在固定相中；最近同样的条件却出现几种异常：1. 洗脱曲线是反的，而且相对于正常情况时洗脱剂的用量增加很多，或者说以前可以用100mL氯仿洗脱回收率可以达到99%，现在回收率却只有50%；2.叶绿素以前是牢牢吸附在硅胶表层的，现在却可以跑的很远，甚至有时候会被洗脱下来；3.现在的情况更蹊跷，干脆什么都不下来了，几倍量的氯仿也洗脱不下什么东西。 相对于以前改变的条件有：1.原来的硅胶用完了，新换的硅胶状况就很不稳定，不正常的情况居多； 2. 总脂提取的时候用饱和氯化钠分层，以前是用水，但是容易出现乳化，相信应该没有多少盐进入有机相。 请各位高手帮忙分析下问题所在和解决方法。我只是要求分开中性脂和极性脂两大类就可以。谢谢回复。 |
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