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mwhtyg

金虫 (正式写手)

[交流] 跪求了!!!

各位虫友:
向你们请教一些问题,真是麻烦你们了。我用的酶里面有硫酸铵,在具体用的时候要把硫酸铵透析出来,可是我是学化学的,对生物上的知识不了解,希望你们能告诉我:1.怎么透析酶使它的活性降低的最小?2.透析过以后怎么测酶的活性?3.透析袋如何选择?
  提供这种酶的人告诉我这种酶是经过曲霉菌发酵得到的,是磷脂酶A2,并且说为了容易保存,他们在里面加入了硫酸铵,用的时候透析一下就可以了。可我不知道怎么透析,希望你们能够告诉我。跪求了!!!
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catzp

银虫 (小有名气)


mwhtyg(金币+1,VIP+0):谢谢您的解答!希望您也能告诉我酶活性的测定!
偷袭时候在4度,低温,可以保持活性。透析带选择要比酶分子量小,这样就能除去硫酸铵而留下酶。至于如何测活性,这个需要根据你的实验吧
2楼2008-09-30 15:08:35
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shawcat

木虫 (正式写手)


mwhtyg(金币+1,VIP+0):谢谢!
不一定只有透析可以脱盐的,也可以用凝胶过滤脱盐啊。
磷脂酶酶活的测定方法网上应该有吧,去搜搜吧!
3楼2008-09-30 21:09:33
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hihoney

铁杆木虫 (职业作家)


透析可以在低温下进行,

或者使用超滤离心管(Millipore)在低温冷冻离心机里进行,转数根据蛋白酶的大小而定,不超过4000rpm

酶活的测定则根据蛋白的性质而定,或使用分光光度法,或其他的性质进行。
4楼2008-10-01 16:28:59
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