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求大神帮忙解答问题，越详细越好。多谢！
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1、利用荧光蛋白转基因的方法研究未知功能蛋白的亚细胞定位时，该蛋白连接在荧光蛋白 的N端好，还是连接在荧光蛋白的C端较好？具体研究中应该采用什么策略？ 2、为什么利用荧光蛋白研究未知功能蛋白的亚细胞定位时，尽量不采用瞬时转染和强启动子的方法？ 3、简述利用BiFC技术测定细胞Ca2+浓度的载体的工作原理? |
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