| 查看: 5463 | 回复: 20 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
hubeilengfei金虫 (正式写手)
|
[求助]
新买的waters Xbridge C18色谱柱用了一个月就坏了，大家帮忙分析下 已有15人参与
|
|
|
色谱柱是waters Xbridge C18（4.6mm*250mm,5um）用来分析化药的，样品为游离碱，浓度为0.5mg/ml，进样量40ul 流动相A为0.01mol/L的磷酸氢二钾（磷酸调节pH为7.5），流动相B为乙腈，梯度如下： 时间（min） 0 5 30 50 51 60 流动相A（%）95 85 75 40 95 95 柱温为30度 色谱柱用了差不多1个月就严重拖尾了，冲了几天也没冲好，就这样五六千就没了，郁闷  在用的过程中柱压一直未升高，每天用完就冲柱了，柱子坏的时候，前一天样品出峰均很正常，没有拖尾的迹象， 求各位帮忙分析下，不胜感激！ |
回复此楼» 猜你喜欢
366求调剂
已经有9人回复
-
材料工程085601，270求调剂
已经有37人回复
-
279学硕食品专业求调剂院校
已经有18人回复
-
290调剂生物0860
已经有31人回复
-
一志愿085802 323分求调剂
已经有13人回复
-
277求调剂
已经有23人回复
-
322求调剂，08工科
已经有4人回复
-
材料工程281还有调剂机会吗
已经有30人回复
-
化学070300 求调剂
已经有16人回复
-
化工学硕294分，求导师收留
已经有12人回复
hubeilengfei
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 435.6
- 帖子: 323
- 在线: 55.7小时
- 虫号: 1084830
- 注册: 2010-08-30
- 性别: GG
- 专业: 生化分析及生物传感
14楼2016-01-11 18:46:00
ruijieyang
捐助贵宾 (著名写手)
- 应助: 5 (幼儿园)
- 金币: 1126.8
- 散金: 707
- 红花: 6
- 帖子: 2098
- 在线: 60.5小时
- 虫号: 1147500
- 注册: 2010-11-15
- 性别: MM
- 专业: 色谱分析
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hubeilengfei: 金币+10, ★有帮助, 就是担心伤柱子才把盐浓度降的较低 2016-01-10 08:30:55
感谢参与，应助指数 +1
hubeilengfei: 金币+10, ★有帮助, 就是担心伤柱子才把盐浓度降的较低 2016-01-10 08:30:55
|
盐浓度低，方法不合适 发自小木虫Android客户端 |
2楼2016-01-10 06:57:57
放花如雪
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 71 (初中生)
- 金币: 6622.6
- 散金: 18
- 红花: 4
- 帖子: 393
- 在线: 179.5小时
- 虫号: 1689111
- 注册: 2012-03-13
- 性别: GG
- 专业: 药物分析
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hubeilengfei: 金币+20, ★★★很有帮助 2016-01-10 08:22:38
hubeilengfei: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢 2016-01-11 18:47:40
感谢参与，应助指数 +1
hubeilengfei: 金币+20, ★★★很有帮助 2016-01-10 08:22:38
hubeilengfei: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢 2016-01-11 18:47:40
|
盐浓度低也能毁柱子？？？？目前按照你提供的信息，原因可能有两种：1.是流动相的pH值，过高，尝试过酸性条件么？2，样品特性。样品进样浓度能降低么，样品本身对柱子有伤害。 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-01-10 07:17:42
klicking
至尊木虫 (著名写手)
- ACI: 9
- 应助: 923 (博后)
- 贵宾: 0.652
- 金币: 19319.5
- 散金: 30
- 红花: 149
- 沙发: 1
- 帖子: 2337
- 在线: 513.3小时
- 虫号: 1426293
- 注册: 2011-10-03
- 性别: GG
- 专业: 药物分析
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hubeilengfei: 金币+30, ★★★★★最佳答案 2016-01-11 18:39:43
感谢参与，应助指数 +1
hubeilengfei: 金币+30, ★★★★★最佳答案 2016-01-11 18:39:43
|
该色谱柱pH范围应该是1-12，因此pH应该不是问题。 对于楼主的描述有两个小疑问：一是为何进样体积是40ul，现在进样体积一般是10或20ul，通常选择10ul，40ul 0.5 mg/ml相当于10 ul 2.0 mg/ml，进样浓度是否太高？ 另外是磷酸缓冲盐的使用中梯度末乙腈比例是否太高，我们一个项目用到磷酸缓冲盐当超过50%的乙腈时特别容易导致色谱柱堵掉，也是非常伤色谱柱的，还有磷酸盐流动相容易长菌，流动相建议现配现用。 建议色谱柱反过来接看看是否有改善！ （还有游离碱pKa是多少？流动相pH怎么会选7.5） |
4楼2016-01-10 08:39:14
10