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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 实时荧光定量RT-PCR实验流程
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israfale

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11楼2016-01-11 08:27:24
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sjshvdc
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12楼2016-01-11 09:11:40
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sqent

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13楼2016-01-11 10:47:08
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18273176704

0.6

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14楼2016-01-11 15:40:52
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阿里夏

新虫 (初入文坛)

0.8

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15楼2016-01-11 16:02:04
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流氓一个

0.6

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16楼2016-01-11 17:52:18
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可可渔家

金虫 (小有名气)
лл
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jdjis
17楼2016-01-12 09:32:22
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hamengni

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
谢谢。不错，有些细节改变能说明理由就更好了。
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18楼2016-01-15 14:08:57
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无畏惧无边际

新虫 (初入文坛)
非常感谢分享
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19楼2016-03-02 16:20:38
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beinglate

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一 样本总类及样本处理要求：
1 新鲜组织：切割标本后放于液氮或者-80℃冰箱保存，也可以直接将适量待测样本置于trizol中在置于液氮或者-80℃冰箱保存。            
2石蜡标本：常温保存；
3全血标本：取适量全血加入EDTA或肝素抗凝采血管，4度保存；或者全血分离单核细胞，液氮或者
-80℃冰箱保存         
4体液标本：高速离心取沉淀；
5细胞标本：细胞加TRizol裂解后液氮或者-80℃冰箱保存。
二 操作步骤（了解）
(一)组织总RNA的抽提
1 将所试验的标本按序排放在管架
2 依次将各组组织100mg(米粒大小)转移至5ml玻璃试管中,依次每一管中加入1ml Trizol(预冷)
电动匀浆器(转速8000r/min)处理30~45秒.每标本间处理后用酒精(75%乙醇的配置:1倍的DEPC处理水加3倍的无水乙醇)棉球擦拭, DEPC处理水清洗.
3 依次将匀浆液转至1.5mlEppendorf管中，加入预冷的氯仿200ul,振荡摇匀15秒4℃,12000r/min, 离心15分钟.
4小心吸出水层加入依次编号的Eppendorf管中,再加入二倍体积预冷的异丙醇(约600 ul),混匀,置于-20℃冰箱,30分钟.
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20楼2016-03-02 17:07:57
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