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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药品生产 » 生产技术 » 胰岛素大肠杆菌重组表达工艺中离子交换前色素去除方法，跪求大侠帮助。
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宇宙心灵

金虫 (小有名气)

[求助] 胰岛素大肠杆菌重组表达工艺中离子交换前色素去除方法，跪求大侠帮助。 已有1人参与

目前，我们工艺中采用的是大肠杆菌重组表达的胰岛素前体，包涵体洗涤后，溶解复性，但是样品颜色呈红黄色，两步离子交换也不能有效去除，给后步骤反相制备造成较大压力。工艺早期也尝试过活性炭吸附色素，实验室简单实验，去除色素效果还可以，但是对目标物吸附太严重，也有可能是选择的活性炭或者样品条件不合适，恳请有这方面经验的技术工作者提供帮助，大恩不言谢！！
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赢在交流！
1楼 2016-01-08 16:25:58
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695113773

木虫 (小有名气)
杂质太多，复性前是否可以考虑增加一步去除蛋白类或者核酸类杂质的步骤。

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3楼2016-01-09 07:55:32
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xgwcat

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以先过凝胶层析试试，但比较浪费尿素。其实可以不管色素，反相层析后复性，最后用凝胶肯定可以干掉色素。

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不断学习中
2楼2016-01-09 07:32:21
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695113773

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 695113773 at 2016-01-09 07:55:32
杂质太多，复性前是否可以考虑增加一步去除蛋白类或者核酸类杂质的步骤。

感觉颜色是残留的核酸造成的

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4楼2016-01-09 07:58:27
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sealandair

木虫 (小有名气)
可以考虑下活性炭类型的选择，之前做一个脂溶性物质脱色时，783型对产品吸附很强，767型吸附较少。
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5楼2016-01-10 22:30:07
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