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求固相萃取仪的使用经验 已有1人参与
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各位虫友， 我想请教下关于固相萃取仪及如何使用它对物质进行纯化，之前从来没用过，请用过的虫友们分享下经验。我这是在纯化全麦粉中提取的叶酸（维生素B9）。 这是我的纯化条件（我对它的理解是这样的，请指正哈） 实验仪器及耗材：固相萃取仪，Baker 7091-3萃取小柱（图片是在网上down的，实验室还没买，如果虫友有推荐的品牌，求分享） 实验试剂：己烷、甲醇、0.1M 磷酸氢二钾（pH8-9）、0.1M乙酸钠（pH4.5）、0.1%抗坏血酸、0.1% 2-巯基乙醇 实验步骤： 1、活化柱子→先加3ml 己烷后加3ml 甲醇润洗柱子 2、平衡柱子→5ml 0.1M磷酸氢二钾溶液润洗 3、上样→用5ml 提取液溶于2ml 磷酸氢二钾中，洗脱速度0.6ml/min 4、冲洗→柱子用2ml 磷酸氢二钾溶液润洗 5、洗脱出样品用3ml 0.1M乙酸钠（pH4.5）（有5% 磷酸氢二钾、0.1%抗坏血酸、0.1% 2-巯基乙醇）洗提，最终过0.45um 过滤亲水膜 问题：1、活化，上样，润洗，冲洗每一步大约是多久呢？ 2、我只需收集最后洗脱出来的样品，那前四步滴加的液体会被柱子吸附而不会留下来对吧？ 3、柱子是可以循环利用的么？还是一次性的呢？  捕获.PNG  1.PNG  IMG140529094405984801.jpg  61561403702872.jpg |
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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1. 每步的时间不一定，从萃取柱滴落的液体控制在1滴/1s就行，不能太快，如果用流速表示大概2～5mL/min。 2. 前几步滴加的液体已经流出萃取柱了 3. 一般是一次性的，不重复利用。 发自小木虫IOS客户端 |
2楼2016-01-08 14:03:26
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