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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 细胞转染问题
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嘉茗ZZ

银虫 (正式写手)
已领完
细胞转染问题
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我转染两个细胞系，除了细胞不一样，其他所有条件都一样，转染24小时之后在荧光显微镜下看都有gfp绿色荧光，之后我就筛选来得到稳转细胞，二周之后筛选结束，没有转染的细胞系细胞都死光了，得到筛选的稳转细胞，结果有一个细胞系的所有转染细胞都没有绿色荧光，而且在可见光下能看到有筛选之后留下来的细胞，而另外那个细胞系的转染细胞就都能看到绿色荧光，这是为什么？

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1楼 2016-01-08 05:19:10
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xiaoguai5431

金虫 (小有名气)
っっっっq

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12楼2016-01-08 05:47:59
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聚晟

铜虫 (著名写手)
加油

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13楼2016-01-08 06:52:36
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hotwater

铁杆木虫 (著名写手)
细胞不同吧

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15楼2016-01-08 07:08:00
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嘉茗ZZ

银虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by hotwater at 2016-01-08 07:08:00
细胞不同吧

主要是lipo3000不太可能一点也没转进去，我筛选之前还看到了绿色荧光，筛选完就没了

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16楼2016-01-08 10:01:46
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198866

铜虫 (小有名气)
加油
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17楼2016-01-08 10:56:42
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chlorella409

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
细胞株的筛选压力还在么，会不会掉了，掉了，了。
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18楼2016-01-08 16:11:33
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yyy0305

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
筛选的阶段，你没有对这两个细胞进行持续的荧光观察？GFP荧光的丢失应该是渐进变化的过程。GFP的存在与否和编码GFP的基因有关，细胞筛选和抗性基因有关，药筛只能说明抗性基因还在，GFP编码基因和目的基因在不在还有待确定，简单粗暴的方法就是测序
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19楼2016-01-08 21:07:25
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嘉茗ZZ

银虫 (正式写手)
引用回帖:
19楼: Originally posted by yyy0305 at 2016-01-08 21:07:25
筛选的阶段，你没有对这两个细胞进行持续的荧光观察？GFP荧光的丢失应该是渐进变化的过程。GFP的存在与否和编码GFP的基因有关，细胞筛选和抗性基因有关，药筛只能说明抗性基因还在，GFP编码基因和目的基因在不在还有 ...

看看我的gfp序列还在不在？噢，谢谢

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20楼2016-01-08 22:08:35
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科研小狗

新虫 (初入文坛)
我也是

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21楼2016-04-05 23:41:38
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嘉茗ZZ

银虫 (正式写手)
引用回帖:
21楼: Originally posted by 科研小狗 at 2016-04-05 23:41:38
我也是

我老板说我的细胞不喜欢gfp，所以让我换别的荧光了

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22楼2016-04-06 02:07:21
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MAYINGTAI2楼
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王顺平3楼
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半仙03564楼
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风叶紫林5楼
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晴天f6楼
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jeolion7楼
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nbjiuxu8楼
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柜子柜子9楼
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oedcad10楼
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强壮11楼
2016-01-08 05:22   回复  
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xdl198214楼
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