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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 确定miRNA与靶基因相互作用
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咖啡豆G

金虫 (小有名气)

[求助] 确定miRNA与靶基因相互作用 已有1人参与

各位大神，我在做一个抗肿瘤蛋白质，推测它可能会干扰miR-21与靶基因3'-UTR的相互作用。通过做双荧光素酶报告基因检测，发现有miRNA与靶基因作用，但是还无法确定是不是miR-21，现在想把靶基因通过PCR做个突变来验证一下，但是我不知道该突变几个碱基。先谢谢大神。！！

确定miRNA与靶基因相互作用
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1楼 2016-01-06 22:13:19
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
咖啡豆G: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 谢谢~~ 2016-01-08 10:04:51
当然是突变种子区啦

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2楼2016-01-07 17:45:12
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咖啡豆G

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 铿锵爪神 at 2016-01-07 17:45:12
当然是突变种子区啦

嗯嗯，谢谢啦。我也在网上又搜了搜。我突变种子区靠中间的两个碱基是不是就可以呢？
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3楼2016-01-08 10:04:14
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 咖啡豆G at 2016-01-08 10:04:14
嗯嗯，谢谢啦。我也在网上又搜了搜。我突变种子区靠中间的两个碱基是不是就可以呢？...

一般都是种子区6到7个碱基都要改变吧

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4楼2016-01-08 15:55:30
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咖啡豆G

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 铿锵爪神 at 2016-01-08 15:55:30
一般都是种子区6到7个碱基都要改变吧
...

突变这么多是不是不容易成功啊。。
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5楼2016-01-08 16:43:13
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 咖啡豆G at 2016-01-08 16:43:13
突变这么多是不是不容易成功啊。。...

你要自己突变吗？我们一般都是送公司的

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6楼2016-01-09 09:11:39
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溶菌酶

金虫 (正式写手)
种子区域突变至少三个，有的paper全突变掉，不过难度似乎很大

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咖啡豆G
Fightforlifewithoutcancer.
7楼2016-01-09 09:15:05
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咖啡豆G

金虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 铿锵爪神 at 2016-01-09 09:11:39
你要自己突变吗？我们一般都是送公司的
...

嗯，要用试剂盒，利用PCR自己突变
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8楼2016-01-09 15:45:56
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咖啡豆G

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 溶菌酶 at 2016-01-09 09:15:05
种子区域突变至少三个，有的paper全突变掉，不过难度似乎很大

喔，谢谢啦，那我试着突变3个，没有金币了，送你一朵红花吧
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9楼2016-01-09 15:47:10
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liufangbgh

新虫 (初入文坛)
我最近也在做mirna靶基因的验证试验，请问楼上的请的什么公司做的吗？关于载体质粒，突变质粒构建，我们也想请公司做。谢谢！
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10楼2016-03-28 10:48:11
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