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momo198420

[交流] 样品用过固相萃取柱之后,为什么不容易吹干?

柱子分别用甲醇,水,PBS活化以后,加入样品,然后再用水淋洗,然后用甲醇洗脱,再吹干,就始终有残留,应该是水相的东西,很困惑,哪里需要注意呢??还有就是用甲醇,水,PBS 活化的时候,是让液体慢慢的留下来,还是自己用洗耳球把液体都打出来呢?在加入样品之前,固相萃取柱里的PBS是要全部吹出来,还是留一点在柱里保持湿润的状态?
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zyp2008

金虫 (初入文坛)

★ ★
momo198420(金币+2,VIP+0):灰常感谢!
任何厂家的SPE小柱都是要求一次性使用的。呵呵
如果你实在要二次使用,可以用以下的方法试一下,不过效果肯定是不如新的,因为某些填料吸附过程是不可逆的
以C18为例:
用洗脱溶液(一般是甲醇),5~10倍于柱管体积,缓慢(2ml/min)过柱,然后用5~15%甲醇水溶液,5~10倍柱管体积,缓慢过柱,最后用100%去离子水,5~10倍柱管体积,缓慢过柱。自然风干备用。
提醒一下,二次使用的柱子不光效果上不能保证,重新活化的过程花费的精力时间试剂,代价可能还大于用新柱。有时候不划算,还不如用新的
5楼2008-09-28 12:56:07
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查看全部 9 个回答

江河之北

铁虫 (著名写手)

柱子洗脱后只需要用希尔球稍微吹一下的,过柱有损失,不可能很准的。
优雅淘宝返利:www.msgrace.org
2楼2008-09-28 08:46:34
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zyp2008

金虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★
momo198420(金币+5,VIP+0):非常感谢,赞!
呵呵我这新虫一直在回复你的帖子
你是用的C18小柱吗?样品里的颗粒物处理干净了吗?洗脱下来没吹干的时候是完全溶液吗?如果不是,残留应该来自筛板泄漏的填料。如果都是的话,你的残留物应该是来自样品本身。
液体流速看你小柱状态,如果自己能流就让它自己流,不能的话就加点正压或负压,但是流速最好不要超过5ml/min(上样也是如此)
加入样品之前PBS不要吹干。活化和上样之间柱子要保持湿润,也就是在你的活化最后一步,液面刚好在上筛板上方的时候上样。可以用刻度移液管或者移液枪。这个时候如果感觉来不及操作,可以把抽真空装置(或者正压)稍微停一下,上了样再开

[ Last edited by zyp2008 on 2008-9-28 at 09:37 ]
3楼2008-09-28 09:10:54
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momo198420

引用回帖:
Originally posted by zyp2008 at 2008-9-28 09:10:
呵呵我这新虫一直在回复你的帖子
你是用的C18小柱吗?样品里的颗粒物处理干净了吗?洗脱下来没吹干的时候是完全溶液吗?如果不是,残留应该来自筛板泄漏的填料。如果都是的话,你的残留物应该是来自样品本身。
...

那你知道固相萃取柱用过一次以后,怎么保养维护活化,再第二次用吗?
4楼2008-09-28 09:51:07
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