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【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ... 三分饿的吧: 金币+140, 翻译EPI+1, ★★★★★最佳答案 2016-01-06 09:20:54
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建立了一种基于单克隆抗体的直接竞争性酶联免疫吸附试验 (dcELISA)用于检测新的beta-肾上腺素能激活剂苯乙醇胺A (PEAA).在分别通过重氮反应和过碘酸钠法将其偶联到载体蛋白产生PEAA-BSA,PEAA-OVA和PEAA-HRP前,以 RANEY (R)镍为催化剂合成了一种PEAA的衍生物 PEAA-NH2。以PEAA-BSA为免疫原免疫3只Balb/C小鼠,获得了稳定产生对PEAA抗体的3个克隆。随后,用单克隆抗体(2H8)和PEAA-HRP建立了dcELISA方法。PEAA浓度在0.025-2.025ng/mL范围内,IC50值为0.204ng/mL。该单克隆抗体对PEAA及其衍生物PEAA-NH2高度特异,对莱克多巴胺有少量交叉反应(CR)(CR = 8.3%),而对15种其它的beta-激活剂化合物的交叉反应可忽略(CR < 0.1%)。对样品测试,空白样品(猪肉、猪肝、猪尿和饲料)的LOD (检测限)值分别为0.431,0.455,0.225和8.693ng/mL;对应的LOQ(定量限)值分别0.578,0.647,0,360和14.477ng/mL。 回收率范围从82%到120%。批间和批内变异系数分别为13.33%和10.53%以下。此外dcELISA还用了液相色谱偶联质谱(LC-MS/MS)法评价,结果显示二法有高相关系数。总之,结果提示此 dcELISA以高灵敏度和特异性可用于可靠检测真实样品中PEAA的残留。 |
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