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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » 求助哪里可以测定核酸解链温度（tm）
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liucd2014

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助哪里可以测定核酸解链温度（tm） 已有1人参与

最近想做一个核酸杂交实验，需要测定核酸解链温度（tm），打算使用带温控的紫外分光光度计，但是找了很多单位都没找到这种仪器。请问各位大侠有没有其他方法可以实现，或者哪位能提供信息，哪个单位有这种仪器，可否申请使用，或者送样测试。非常感谢！
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1楼 2016-01-05 13:10:08
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lifechuteng

新虫 (小有名气)
生工有HRM服务，不知可否应用于您的实验
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2楼2016-01-05 13:33:18
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liucd2014

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lifechuteng at 2016-01-05 13:33:18
生工有HRM服务，不知可否应用于您的实验

非常感谢您的帮助，请问一般的HRM检测是不是需要样品带有荧光信号的？我的物质没有荧光标记的，只有紫外吸收，不知道是不是可行？
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3楼2016-01-05 15:12:36
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lzp19900213

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
liucd2014(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-05 19:28:24
用罗氏qPCR仪中的链溶解曲线程序就可以看出来解链温度吧，可以试试！
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欢迎交流！
4楼2016-01-05 16:29:57
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liucd2014

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lzp19900213 at 2016-01-05 16:29:57
用罗氏qPCR仪中的链溶解曲线程序就可以看出来解链温度吧，可以试试！

非常感谢您的帮助，实时PCR仪是不是也需要样品带荧光信号？我的样品就是两条单链，没有荧光标记过。
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5楼2016-01-06 08:47:09
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lzp19900213

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
liucd2014: 金币+4, ★★★很有帮助 2016-01-06 09:30:04
引用回帖:
5楼: Originally posted by liucd2014 at 2016-01-06 08:47:09
非常感谢您的帮助，实时PCR仪是不是也需要样品带荧光信号？我的样品就是两条单链，没有荧光标记过。...

反应需要加入做定量pcr的荧光染料，很简单，几分钟就可以出结果，样本本身不用带荧光标记，不过样本浓度高点好，做的时候用10ul体系就可以！

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欢迎交流！
6楼2016-01-06 09:15:40
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翁盐wdxj

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by lzp19900213 at 2016-01-06 09:15:40
反应需要加入做定量pcr的荧光染料，很简单，几分钟就可以出结果，样本本身不用带荧光标记，不过样本浓度高点好，做的时候用10ul体系就可以！
...

您好，我用20ul体系，10ul mix，10ul样本，孵育30min，去跑PCR的熔解曲线。但是结果显示，荧光纸一直下降，但是没有突降，形成峰。请问您上样量有多少？mg级别还是ug
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7楼2018-11-05 13:36:33
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