24小时热门版块排行榜

>论坛更新日志 (3741)
>虫友互识 (277)
>休闲灌水 (237)
>文献求助 (235)
>导师招生 (176)
>考博 (114)
>硕博家园 (104)
>基金申请 (83)
>论文投稿 (71)
>考研 (56)
>博后之家 (51)
>招聘信息布告栏 (39)
>公派出国 (38)
>教师之家 (26)
>论文道贺祈福 (25)
>找工作 (22)

返回列表

末页

yang2325182

金虫 (正式写手)

应助: 89 (初中生)
金币: 1615.4
散金: 364
红花: 15
帖子: 902
在线: 119.9小时
虫号: 2956995
注册: 2014-02-07
专业: 合成药物化学

[交流] 酶活定义

大家好，我最近在做一个固定化酶相关的实验，需要比较固定化酶(immobilized enzyme)与游离酶（free enzyme）之间一些性质的差异。
我看文章上大家基本都是用relative activity来表示没活性的差异，比如说把某个催化活性作为百分之百，其他的跟他比，而在实际实验测量
过程中，有些人是将反应生成物啊，hplc峰面积啊等等作为酶活力的衡量指标。
我想请问一下，这种相对的设定是有一定的规矩的吗？还是说必须要测量米氏常数来衡量。因为从米氏常数的定义来看的话，在反应经过较长
时间之后，确实是不能够很好的反应酶与底物的亲和性，而作为初始反应速率的米氏常数可能会更合适吧。
所以在此发帖，希望能够得到虫友的帮助，求指点，我到底该用哪个来作为我的酶活呢？

另外，我想问一下，我是否可以选择合适的底物浓度与酶浓度，确保我的底物水解量保持在短时间内（5min内）处于一个较低的水解率（小于10%）这样，保证底物还是处于一个较高的浓度，这样的底物的水解量，是否可以代表初始反应速率？而我不需要去计算米氏常数km kcat（由于反应难于监测，测量误差经过计算会很大）直接用这样的底物水解值做一个relative activity?

求大神指点~~

回复此楼