| 查看: 2122 | 回复: 0 | ||
[求助]
Blue Native-PAGE条带弥散
|
| 最近在做native-PAGE，要观察的蛋白是否存在两种不同的聚体，二聚体91KD和四聚体200KD（四聚体已经确定存在），该重组蛋白，酸性蛋白，PI 为5.4左右，带有his-tag标签，Ni-NTA纯化后，能够检测到酶活。用的是life technologies 的Blue-native PAGE 预制胶。但是跑native-PAGE之后，条带弥散，marker（最左边）也跑得很不好，如图。电泳时间很长，80V 1小时，110V跑了7个小时，4度环境下跑的。请各位大神分析一下原因。是蛋白浓度过高？我是按照说明书操作的，但是我的蛋白是纯化过的，上样量在1.1到4.4ug之间。或者是电泳条件的原因？还是蛋白需要用detergent增溶一下？但是我的蛋白不是膜蛋白，应该不存在这个问题。还有，我是不是换成Tris-gly电泳体系跑，是不是，结果更糟啊。 |
回复此楼» 本帖附件资源列表
-
欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : WP_20151208_09_48_21_Pro.jpg
2016-01-04 11:47:03, 1.36 M
» 猜你喜欢
26/27申博自荐
已经有10人回复
-
东北林业大学材料科学与工程学院“一流”A+学科国家级人才团队课题组招收2026级博士生
已经有3人回复
-
医学类期刊求推荐
已经有5人回复
-
生活琐事由它去
已经有4人回复
-
提交了我也来说说感想
已经有12人回复
-
青B发送上会通知了吗
已经有9人回复
-
西安交大新媒学院副院长用撤稿论文结题
已经有6人回复
-
论文撤稿了
已经有8人回复
-
化学专业申博
已经有4人回复
-
某211大学教师把个人教师官方主页改成:我跑了我跑了我跑了!官宣跑路！
已经有5人回复