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问个southern杂交的问题
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使用Roche DIG标记得试剂盒,DIG标记完探针后,20ul,想要稀释后加到杂交液中,请问用什么稀释啊,用给的vial3中的溶液么,里面的液体很少的。另外,vail3说明书上说是稀释DNA的,为什么里面要有sperm DNA呢? 另外,我的探针400bp多,按照公式算出的Topt=42度,但是一般的protocol中都是用65-68度杂交,到底应该使用哪个温度呢? |
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