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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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【有奖交流】积极回复本帖子,参与交流,就有机会分得作者 xiaoyu1014126 的 8 个金币

xiaoyu1014126

木虫 (正式写手)

[交流] 请教高手:紫外吸收法测定细菌核酸含量的方法

本人想测定不同培养基中细菌的生长量,所以想用提取细菌核酸在用紫外吸收的方法进行测定,由于本人不是做分子的外行人员,所以请教各位高手,
  1.如何提取细菌的核酸
  2.进行紫外吸收测定核酸含量时有什么要注意的!如何将吸光值能转化成核算的具体含量啊,以此来推算细胞的浓度呢!!
  谢谢~~~~
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shenye.judy

木虫 (正式写手)


xiaoyu1014126(金币+1,VIP+0):谢谢
DNA浓度(ug/ml)=50*A260
2楼2008-09-27 16:13:11
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)


xiaoyu1014126(金币+1,VIP+0):谢谢
1、如果是新手然后没有旁人指导,那么买试剂盒提
2、基本上和楼上一样,不过,记得稀释了再测

用核酸来换算细胞浓度不好
你可以
1、计数
2、直接测菌液OD(先做好标准曲线)
3楼2008-09-27 17:12:45
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bbcaaa888

铁虫 (小有名气)

细菌的生长量不用提核酸,楼主可能误会了,看到测OD定细菌量就以为根据核酸定量的,要提核酸,其实不是,那是测的浊度,测的是OD600,不是OD260, 280;

所以直接拿细菌测OD600即可。很简单

当然从OD600换算到细菌数量还不能完全确定,因为不同菌比例不同。大致上1OD相当于109左右的细菌。可以参考其它的帖子。

[ Last edited by bbcaaa888 on 2008-9-28 at 14:10 ]
4楼2008-09-28 14:08:05
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