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求教黑曲霉的基因组提取应该注意的地方
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求各位大神指教,菜鸟采用的是CTAB提取法: 低温研磨菌体,加3mlCTAB,其中含0.6mg的蛋白酶k,水浴30min,然后加入苯酚:氯仿(1:1),离心5000转10min,取上清液,加入等体积的氯仿:异戊醇(24:1),10000rmp 10min,取上清液,加入等体积的异丙醇-20℃过夜,然后离心10000rmp 10min ,收集沉淀,用70%的冰乙醇洗涤离心10000rmp 10min ,重复两次,风干,37℃消解RNA。我每次在加异丙醇离心后得到的都是黑黑的沉淀,最后溶解的也是黑的还有部分不溶解的。我在提其他的菌的时候都能够提取出来,就是黑曲霉提不出来。 希望大神指导 |
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