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珂涵

铁虫 (初入文坛)

[求助] 质粒构建 已有1人参与

好心的师哥师姐帮帮忙！

质粒构建


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1楼 2016-01-01 14:21:16
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珂涵

铁虫 (初入文坛)
第三题，帮帮忙

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2楼2016-01-01 14:22:53
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siriusxuan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看不清楚
设计PCR引物：
上游 保护碱基- Nco1-Ala-Pro序列
下游 Pst1的 3端-BamH1序列-保护碱基
用给出PHIC7为模板PCR，用Nco1和BamH1双酶切PCR产物 和 pFLC那个载体。在琼脂糖胶中分离并且回收两个酶切后片段，用T4 Ligase 连接后转化到E coli.
过夜生长后挑取单克隆用Nco1和BamH1双酶切鉴定或者测序。
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此座可言轻社稷，江山万里起风尘。
3楼2016-01-03 22:36:33
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