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tuhangul622

金虫 (小有名气)
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9楼: Originally posted by 青蛙快飞 at 2016-01-02 21:16:46
整个没有条带，还是你要的那个分子量的蛋白没有

整个没有条带，然后我前天提高胶又做了一次，看到了条带，但是特别的暗，不仔细看就看不清楚，所以就怀疑是浓度问题，前天去做离子交换层析，很多都穿透出去了，这个除了ph的问题，还可能就是浓度问题
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11楼2016-01-06 16:01:18
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tuhangul622

金虫 (小有名气)
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5楼: Originally posted by 飞椽 at 2016-01-02 15:41:04
那你就做一系列对照，不同浓度都做一下，还能给你论文加一章
...

问题是我现在浓缩到的最高的浓度都是0.198mg/ml，这个的电泳条带都特别暗
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12楼2016-01-06 16:02:44
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匿名

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13楼2016-01-06 22:20:23
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14楼2016-01-06 22:40:27
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tuhangul622

金虫 (小有名气)
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13楼: Originally posted by 青蛙快飞 at 2016-01-06 22:20:23
你测的是粗提的浓度的话，用考马氏测，Tris,SDS都会有影响测定浓度，不准
...

我是用考马斯亮蓝法测的浓度，粗酶液里没有sds,tris类的物质

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15楼2016-01-07 09:26:06
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tuhangul622

金虫 (小有名气)
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14楼: Originally posted by 青蛙快飞 at 2016-01-06 22:40:27
一般能检测到纳克级别的，考马氏亮蓝染色的话，50ng以上的就很明显了，试着摸索下染色脱色时间看看

50ng 以上就会很明显吗？但我的感觉不太好，我染色的条件应该没错，因为我把别人的蛋白质样品作为对战一起跑了，结果对照和maker 都跑的特别好，就我的暗暗

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16楼2016-01-07 09:28:33
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匿名

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17楼2016-01-07 13:15:45
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一念执着00

木虫 (正式写手)
楼主，你的蛋白浓度是否低了点，我再做PAGE胶时一般蛋白浓度为5ug/ul，上样量10-20ul，一般做电泳的每个永道里蛋白有效范围50-120mg效果最佳

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18楼2016-01-07 16:46:34
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tuhangul622

金虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 一念执着00 at 2016-01-07 16:46:34
楼主，你的蛋白浓度是否低了点，我再做PAGE胶时一般蛋白浓度为5ug/ul，上样量10-20ul，一般做电泳的每个永道里蛋白有效范围50-120mg效果最佳

对，我就是在纠结，是不是因为蛋白质浓度太低了，我的蛋白质浓度最高也是0.198mg/ml
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19楼2016-01-07 17:25:22
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一念执着00

木虫 (正式写手)
引用回帖:
19楼: Originally posted by tuhangul622 at 2016-01-07 17:25:22
对，我就是在纠结，是不是因为蛋白质浓度太低了，我的蛋白质浓度最高也是0.198mg/ml...

这个问题就是你的蛋白浓度太低了，提高蛋白浓度做做看，这个实验不难祝你早日成功！

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20楼2016-01-07 17:33:43
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