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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 切片相关 » 冰冻切片相关
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小羊123

银虫 (著名写手)

[求助] 冰冻切片相关 已有2人参与

请问冰冻切片的总体步骤是：
一：取组织（不用PBS洗吗？）直接放入异戊烷中（异戊烷放在易拉罐中置于液氮内）
二：锡箔纸叠个小盒放在冷台上（这个冷台，下面放液氮，上面放个纸壳可以吧？），放点oct等凝固后，取出组织，置于小盒中，倒满oct，将小盒底部置于液氮上，使之冷却凝固。
三：冰箱零下80度保存。
步骤有什么问题吗？新鲜组织要洗吗？冷台那样制备可以吧？还有就是没有零下80度的冰箱，放零下20度可以吗？问题很琐碎，真是太不好意思了。
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1楼 2015-12-31 14:38:04
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三三XX

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
组织直接用生理盐水冲洗后放入锡纸筒内，注入OCT没住组织后直接放入液氮，凝固后转入-20摄氏度冰箱即可，但要储存时间不宜过久

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一叶知秋
2楼2015-12-31 18:52:33
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一肥到底

金虫 (正式写手)
我就是来看看的。

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3楼2016-01-01 19:49:57
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小羊123

银虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 一肥到底 at 2016-01-01 19:49:57
我就是来看看的。

看完赶紧走-_-||

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4楼2016-01-01 23:12:28
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一肥到底

金虫 (正式写手)
这么不受欢迎啊。

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5楼2016-01-03 12:30:02
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zhenghao0924

铁虫 (小有名气)
我这边是固定完后取出来放模具里，然后-80冰箱放几小时，然后拿去冰冻切片机里复温半小时后开始切

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Do what you like and like what you do.
6楼2016-01-03 15:30:50
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小羊123

银虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 三三XX at 2015-12-31 18:52:33
组织直接用生理盐水冲洗后放入锡纸筒内，注入OCT没住组织后直接放入液氮，凝固后转入-20摄氏度冰箱即可，但要储存时间不宜过久

请问锡桶叠成这个样子可以吗？好丑啊
冰冻切片相关


冰冻切片相关-1



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7楼2016-01-04 10:11:45
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三三XX

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

只要不漏就可以，上面栓根线，方便在液氮罐里放取

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一叶知秋
8楼2016-01-05 07:29:40
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小羊123

银虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 三三XX at 2016-01-05 07:29:40
只要不漏就可以，上面栓根线，方便在液氮罐里放取

好的，谢谢。

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9楼2016-01-05 08:28:36
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zhongliruoqi

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by zhenghao0924 at 2016-01-03 15:30:50
我这边是固定完后取出来放模具里，然后-80冰箱放几小时，然后拿去冰冻切片机里复温半小时后开始切

请问下你所说的“模具”是指 包埋盒底模吗？最近有试过，包埋的是小鼠的脑组织块，感觉不是很好用呢。。因为规格厚度上只有5mm和12mm的可选，买的12mm的规格30*20*12，很费OCT不说，脑组织块放进去很容易沉下去接近底部呢，有什么建议吗？
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10楼2016-06-29 17:28:28
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