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小羊123

银虫 (著名写手)

[求助] 冰冻切片相关 已有2人参与

请问冰冻切片的总体步骤是:
一:取组织(不用PBS洗吗?)直接放入异戊烷中(异戊烷放在易拉罐中置于液氮内)
二:锡箔纸叠个小盒放在冷台上(这个冷台,下面放液氮,上面放个纸壳可以吧?),放点oct等凝固后,取出组织,置于小盒中,倒满oct,将小盒底部置于液氮上,使之冷却凝固。
三:冰箱零下80度保存。
步骤有什么问题吗?新鲜组织要洗吗?冷台那样制备可以吧?还有就是没有零下80度的冰箱,放零下20度可以吗?问题很琐碎,真是太不好意思了。
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三三XX

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
组织直接用生理盐水冲洗后放入锡纸筒内,注入OCT没住组织后直接放入液氮,凝固后转入-20摄氏度冰箱即可,但要储存时间不宜过久

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一叶知秋
2楼2015-12-31 18:52:33
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一肥到底

金虫 (正式写手)

3楼2016-01-01 19:49:57
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小羊123

银虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 一肥到底 at 2016-01-01 19:49:57
我就是来看看的。

看完赶紧走-_-||

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4楼2016-01-01 23:12:28
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一肥到底

金虫 (正式写手)

5楼2016-01-03 12:30:02
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zhenghao0924

铁虫 (小有名气)

我这边是固定完后取出来放模具里,然后-80冰箱放几小时,然后拿去冰冻切片机里复温半小时后开始切

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Do what you like and like what you do.
6楼2016-01-03 15:30:50
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小羊123

银虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 三三XX at 2015-12-31 18:52:33
组织直接用生理盐水冲洗后放入锡纸筒内,注入OCT没住组织后直接放入液氮,凝固后转入-20摄氏度冰箱即可,但要储存时间不宜过久

请问锡桶叠成这个样子可以吗?好丑啊
冰冻切片相关


冰冻切片相关-1



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7楼2016-01-04 10:11:45
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三三XX

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

只要不漏就可以,上面栓根线,方便在液氮罐里放取

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一叶知秋
8楼2016-01-05 07:29:40
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小羊123

银虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 三三XX at 2016-01-05 07:29:40
只要不漏就可以,上面栓根线,方便在液氮罐里放取

好的,谢谢。

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9楼2016-01-05 08:28:36
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zhongliruoqi

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by zhenghao0924 at 2016-01-03 15:30:50
我这边是固定完后取出来放模具里,然后-80冰箱放几小时,然后拿去冰冻切片机里复温半小时后开始切

请问下你所说的“模具”是指 包埋盒底模吗?最近有试过,包埋的是小鼠的脑组织块,感觉不是很好用呢。。因为规格厚度上只有5mm和12mm的可选,买的12mm的规格30*20*12,很费OCT不说,脑组织块放进去很容易沉下去接近底部呢,有什么建议吗?
10楼2016-06-29 17:28:28
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