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proteinwang

铜虫 (正式写手)

[交流] 基因组DNA的提取!

大家好,本人在提取枯草芽孢杆菌基因组DNA的时候,发现提取后的DNA呈微黄色,请问一下有没有 相同的经历的?这种色素是怎么来的,怎么才能除去呢?
在一个我感觉提取的总DNA的量比较少,有时候还不如提取的质粒的量多,大家一般提取基因组DNA时采用菌体的什么生长阶段,OD大约多少?
我的提取方法是
1 接种后37度,过夜,5ml/试管。
2 8000rpm,1min收集菌体,收集3ml/管。
3 每管加入100ul破菌悬液,0.3g石英砂,200ul酚-氯仿-异戊醇,漩涡振荡3min。
4 加入TE200ul,摇匀后,13000rpm 3min,取上清。
5 上清中加入1ml无水乙醇,混匀,-20度30min
6 13000rpm 3min得到Dna,室温干燥,加TE溶解,-20度保存。

各位好的方法的也一块共享一下吧!
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 7-18 08:22
加pvp和巯基乙醇
2楼2008-09-26 20:16:02
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fangjh0302

铜虫 (初入文坛)


司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢交流 7-18 08:22
革兰氏阳性菌破壁比较困难,你可以加点溶菌酶
3楼2008-09-27 17:25:00
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